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目的:初步研究内质网应激蛋白在慢性乙肝(chronic hepatitis B,CHB)患者外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMC)中的表达水平,分析PBMC中内质网应激蛋白与CHB患者病情严重程度的相关性,为临床预测CHB患者病情的发展提供参考。方法:1.收集健康体检者外周血标本41例,CHB患者外周血标本102例,采用密度梯度离心法分离PBMC;2.抽取22例CHB患者PBMC样本,采用荧光探针PCR检测PBMC中的HBV-DNA;3.将6例健康体检者PBMC接种于细胞培养板中,培养24h后,对照组加入5μL、10μL、15μL和20μL健康体检者血清,实验组加入5μL、10μL、15μL和20μLCHB患者血清(HBV-DNA为10~7copies/mL),继续培养24h后收集PBMC,采用荧光探针定量PCR检测加入CHB患者血清后PBMC中的HBV-DNA,采用实时荧光定量PCR技术检测葡萄糖调节蛋白78(glucose regulator protein,GRP78)、葡萄糖调节蛋白94(glucose regulator Protein,GRP94)和C/EBP同源蛋白(C/EBP homologous protein,CHOP)在基因水平的表达量;4.取健康体检者(35例)和CHB患者(轻度30例、中度25例、重度25例)的PBMC样本,采用实时荧光定量PCR和WB(western-blot,WB)技术检测GRP78、GRP94和CHOP在基因和蛋白水平的表达量,并分析其表达量与CHB患者谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)和谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的相关性。结果:1.在抽取的22例CHB患者PBMC中均可检测到HBV-DNA;2.在健康体检者PBMC中加入不同量的患者血清培养后PBMC中可以检测到HBV-DNA,实验组与对照组相比,5μL血清组CHOP在基因和蛋白水平上的表达量无显著差异(P>0.05),其余各组在基因水平上的表达量均有升高,与对照组相比较,均有显著差异(P<0.05);3.病情程度不同的CHB患者组与健康体检者组相比,CHB患者轻度组CHOP在基因和蛋白水平上的表达量无显著差异(P>0.05),其余各组GRP78、GRP94和CHOP的表达量均有显著差异(P<0.05),并随病情的加重而升高,且CHB患者各组的GRP78、GRP94和CHOP表达量的变化与其外周血的ALT和AST变化呈正相关。结论:CHB患者PBMC中内质网应激蛋白GRP78、GRP94和CHOP在基因和蛋白水平上的表达量随病情的加重而升高,且与其外周血ALT、AST的变化有相关性,内质网应激蛋白的升高可能与肝脏炎症程度有关。