目的　　 Nodal蛋白是转化生长因子TGF-β超家族成员之一,Nodal信号通路在胚胎发育过程中主要影响中内胚层诱导和胚胎左右不对称发育。最近研究发现其在前列腺癌、子宫内膜癌等肿瘤的发生过程中起诱导作用,但在胃癌中的作用不清,故检测Nodal蛋白在正常胃粘膜、胃癌前病变及胃癌中的表达差异情况,并探讨其在胃癌发生和转移过程中的作用。　　 方法　　 临床病理资料及组织芯片制作:收集中国医科大学附属第一医院肿瘤外科手术切除胃癌标本135例,其中同时收集配对99例正常胃粘膜,18例慢性萎缩性胃炎,34例肠上皮化生以及4例异型增生。标本离体后尽快取材,10%甲醛固定24h,取材组织厚4mm,常规组织处理、石蜡包埋,制成目标蜡块,做4μm组织切片,用于目标组织定位。采用组织芯片制作仪将胃癌及其癌前病变以及配对正常胃粘膜等目标组织构建于组织芯片蜡块中,行4μm连续切片,备用。　　 免疫组化染色与结果判定:用PV9000法检测Nodal的表达情况。PV9000试剂盒购自北京中杉金桥生物技术公司。Nodal鼠抗人单克隆抗体(工作浓度1:350)购自美国Abcam公司。采用柠檬酸修复液(pH6.0)高压修复抗原,PBS替代一抗做阴性对照。结果判定:Nodal免疫组化染色采用DAB显色系统显色,Nodal蛋白阳性为棕黄色颗粒定位于细胞浆。免疫组化结果由两位观察者采用盲法每个病例随机选择2个高倍视野,计数200个细胞,按照阳性细胞数占同类细胞数的比例,进行等级划分。结果采用半定量计分方法,根据细胞染色强度(A)和染色细胞所占的比例(B)两者乘积来判定。即:(A):染色强度按下列标准评定记分:0分为无色,1分为浅黄色,2分为棕黄色,3分为棕褐色;(B):染色的阳性细胞占比例按下列标准评定记分:0分为阴性细胞或弱阳性细胞＜5%,1分为阳性细胞占5～10%,2分为阳性细胞占11%～50%,3分为阳性细胞占51%～75%,4分为阳性细胞＞75%。两种评分相乘(AxB),将结果分为:0分为阴性(-);1～4分为弱阳性(+);5～8分为中度阳性㈩;9～12分为强阳性(+++)。　　 结果　　 胃癌组织中Nodal蛋白的阳性表达率(69.6%,94/135)显著高于正常粘膜(22.2%,22/99)和慢性萎缩性胃炎(33.3%,6/18),P＜0.05。肠上皮化生中(58.8%,20/34)Nodal蛋白的阳性表达率也显著高于正常胃粘膜,P＜0.05。肠上皮化生和异型增生(25.0%,1/4)中Nodal蛋白的阳性表达率与胃癌中Nodal蛋白的表达差异无统计学意义。Nodal蛋白在有远处转移胃癌(80.4%)中阳性表达率显著高于无远处转移(62.0%),TNM分期Ⅳ期(80.4%)显著高于Ⅲ期(54.8%),P＜0.05。Nodal蛋白表达与胃癌患者性别、年龄、Lauren分型、WHO组织学分型、浸润深度、区域淋巴结转移无显著相关性,P＞0.05。　　 结论　　 Nodal蛋白在胃癌前病变及胃癌组织中的阳性表达率均显著高于正常胃粘膜,提示其可能作为致癌因子参与了胃粘膜上皮细胞的恶性转化过程。胃癌组织中Nodal蛋白表达与胃癌远处转移、TNM分期相关,提示Nodal蛋白可能参与了胃癌的侵袭和转移。