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恶性肿瘤的生长、转移依赖于血管形成，肿瘤血管生成受到血管生成促进因子和抑制因子的双重调控。内皮抑素(endostatin)是1997年由O’Reilly等从小鼠血管内皮瘤培养液中分离到的一种血管生成抑制因子蛋白。初步研究表明，内皮抑素能抑制内皮细胞分裂，抑制肿瘤的生长和转移。但由于抗血管生成疗法总体上仅能抑制肿瘤生长，并不能完全取代传统的针对肿瘤本身的治疗方法，单独使用时很难完全治愈肿瘤，因此，研究探讨血管抑制剂与传统放、化疗的联合治疗作用已成为当今肿瘤治疗研究的热点。而迄今为止，有关内皮抑素和电离辐射对恶性肿瘤的联合作用研究，国内未见报道，国外研究也甚少。鉴此，本文采用基因工程技术，观察内皮抑素对血管内皮细胞的影响，以及内皮抑素对肺腺癌移植瘤的抑制作用，并进一步探讨内皮抑素与电离辐射对肺腺癌的联合治疗作用，电离辐射对临床肺腺癌患者血清中血管生长因子的影响。旨在为临床恶性肿瘤治疗提供新的策略和依据。 第一部 逆转录病毒介导内皮抑素基因转移及其表达产物对血管内皮细胞的生长抑制作用 目的：建立逆转录病毒介导内皮抑素基因转移系统，探讨内皮抑素基因表达产物对血管内皮细胞的生长抑制作用 方法：分子克隆方法构建携带内皮抑素基因的逆病毒载体LEndoSN，以脂质体介导法结合“乒乓转导”策略获得高滴度的双嗜型内皮抑素病毒，并转导入人肺腺癌A549细胞，聚合酶链反应(PCR)分析内皮抑素基因的转移和表达，ELISA法测定内皮抑素蛋白的表内皮抑素基因转移联合电离辐射对肺腺癌的实验性治疗及相关临床研究摘要达、细胞计数，3氢一胸腺喀咤脱氧核糖核昔(3H一TdR)掺入法检测内皮抑素对血管内皮细胞体外生长的抑制作用，流式细胞仪(FCM)、DNA片段化分析观察内皮抑素引起血管内皮细胞的凋亡。 结果:PCR证实经转导的人肺腺癌A549细胞基因中整合有Endostatin基因的DNA，RT一PCR法证实Endostatin基因能有效表达mRNA，ELISA法测得含内皮抑素基因的A549细胞上清液中表达有内皮抑素蛋白，细胞计数法、3H一TdR掺入法表明内皮抑素可明显抑制血管内皮细胞的生长，流式细胞仪(FCM)、DNA片段化分析观察到内皮抑素可诱导血管内皮细胞的凋亡。 结论:逆转录病毒能高效介导内皮抑素基因转移，内皮抑素基因表达产物能明显抑制血管内皮细胞的生长、诱导血管内皮细胞凋亡。