小麦黄花叶病毒(WYMV)RNA2编码基因的功能研究

来源 :浙江师范大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:chichizhang
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近年来,在我国冬小麦主要产区,由禾谷多黏菌传播的小麦黄花叶病日益严重。该病由小麦黄花叶病毒(Wheat yellow mosaic virus, WYMV)引起。WYMV属于马铃薯Y病毒科大麦黄花叶病毒属成员,其基因组由两条单链正义RNA组成,其中RNA1编码的蛋白有:P3、7K、CI、14K、Nla-VPg、NIb-VPg和CP, RNA2编码P1和P2蛋白,与已知马铃薯Y病毒属成员编码的HC-Pro具有相似的结构域。HC-Pro是研究最深入的病程蛋白之一,在病毒的复制、运输、移动、RNA沉默抑制和病毒致病性等方面有着重要的功能。本研究对WYMV P1和P2与马铃薯Y病毒属成员HC-Pro的功能进行了对比研究。通过对WYMV P1抗血清免疫分析,明确P1抗血清不与WYMV粒子反应,表明P1不直接参与病毒粒子的包装;利用农杆菌共浸润实验,明确WYMV P1和P2没有抑制同源基因诱导的RNA沉默;通过将WYMV P1, WYMV P2的N端P2N以及P1和P2N的复合蛋白P1P2N分别克隆到马铃薯X病毒(Potato virus X, PVX)侵染性克隆,摩擦接种本氏烟,结果表明WYMV P1和P2N对PVX症状的表达影响不大,而P1P2N能够轻微加重PVX的在本氏烟上的症状,HC-Pro(PVY)明显加重了PVX的症状;利用双分子荧光互补(BiFC)技术,在植物和昆虫细胞表达体系中研究表明WYMV P1可以进行自我互作,也与WYMV VPg特异性互作;通过亚细胞定位分析WYMV P1、VPg分别单独表达和一起表达时在细胞中的分布,发现P1可以改变VPg在亚细胞中的分布。根据上述研究结果,我们推测WYMV P1功能与马铃薯Y病毒属成员HC-Pro的功能特性有所不同,并发现WYMVP1可能通过调节VPg亚细胞分布,协助VPg而实现其功能。
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