本论文研究工作为“国家自然科学基金项目－乳香－没药对药协同增效及其分子机制研究”的部分研究内容。　　第一章本论文对芳香类药用植物的抗炎镇痛活性成分及其作用机制进行归纳总结，发现其抗炎镇痛活性成分主要包括挥发油类、苯丙素类、黄酮类、三萜类、生物碱类、有机酸类等化合物；其抗炎镇痛作用机制主要与抑制炎性介质的释放、作用于阿片受体、抑制肾上腺素的合成、调节NO的合成水平有关。为开展实验研究工作提供理论依据。　　论文对类风湿性关节炎(RA)的发病机理、实验动物模型、中药治疗现状进行综述。为开展试验研究提供依据与参考。　　第二章采用佐剂性关节炎大鼠(AA)模型对乳香－没药药对配伍前后抗炎效应进行评价。实验结果表明：乳香、没药、药对水提醇沉上清液高低剂量组均能显著抑制AA大鼠血浆和足跖肿胀组织中NO、IL－2、PGE2、TNFα的生成(P<0.001)，显著抑制肿胀组织中MDA的生成(P<0.001)，显著抑制AA大鼠足跖肿胀程度(P<0.001)；药对低剂量组抑制AA大鼠血浆中PGE2、TNFα生成的作用较单味药优，抑制肿胀组织中MDA、PGE2生成的作用也较单味药优，提示两药配伍后抗炎活性增强。　　第三章对乳香－没药配伍前后体外抗炎活性进行评价。采用原代巨噬细胞模型、体外抗氧化实验、体外抗凝血实验对乳香－没药及其效应部位的生物效应进行评价。研究结果分述如下：　　1、巨噬细胞分泌NO的研究表明：与乳香、没药水煎液相比，药对水煎液抑制NO释放的活性增强，其IC50分别为165.77、25.38、7.66μg/mL，提示两药配伍存在一定的协同增效作用；配伍后药对水提醇沉上清液经大孔吸附树脂(型号：101)洗脱的40％乙醇洗部位抑制NO释放活性较各单味药物增强，其IC50为0.0102μg/mL，提示两药配伍存在明显的协同增效作用；配伍后药对80％醇洗部位抑制NO释放活性(IC50为0.827μg/mL)优于乳香，弱于没药(IC50为0.16μg/mL)；药对95％醇洗部位抑制NO释放的IC50为0.00494μg/mL，与其他部位比较活性为最强。与单体3－羰基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸、3－乙酰基氧基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸、α－香树素相比，单体2－甲氧基－8，12－环氧－吉玛－1(10)，7，11－三烯－6－酮、2－甲氧基－5－乙酰氧基－呋喃－吉玛－1(10)－烯－6－酮的活性较显著，IC50分别为：0.0729、0.0895μg/mL。　　2、抗氧化实验表明：乳香、没药、药对水提醇沉上清部位清除DPPH自由基的IC50分别为166.4、73.365、89.815μg/mL；配伍后药对40％醇洗部位清除DPPH自由基活性较乳香、没药各单味药物增强，其IC50分别为31.228、47.346、67.726μg/mL，提示两药配伍存在一定的协同增效作用；没药80％醇洗部位清除自由基的活性较药对配伍后的活性强，其IC50分别为81.34、190.60μg/mL。　　3、抗凝血实验表明：乳香、没药、药对水煎液抑制凝血酶活性的IC50分别为0.00367、0.00435、0.00315 mg/mL，乳香、没药、药对水提醇沉上清部位抑制凝血酶活性的IC50分别为0.0161、0.0980、0.00103 mg/mL，乳香、没药、药对80％醇洗部位抑制凝血酶活性的IC50分别为0.041、0.049、0.0092 mg/mL，提示两药配伍存在一定的协同增效作用；单体2－甲氧基－8，12－环氧－吉玛－1(10)，7，11－三烯－6－酮、2－甲氧基－5－乙酰氧基－呋喃－吉玛－1(10)－烯－6－酮、3－乙酰基氧基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸、3－羰基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸、α－香树素、α及β-乙酰乳香酸混合物抗凝血活性的IC50分别为0.0061、0.071、0.001、0.0011、0.0038、0.0023 mg/mL。　　第四章对乳香－没药的效应物质基础进行研究。　　1.采用UPLC/Q－TOFMS联用技术结合MarkerLynx4.1软件分析乳香－没药药对合并液与合煎液之间化学成分的差异，研究结果表明：两者合煎后五环三萜类化合物(α-乳香酸、β-乳香酸)、四环三萜类化合物(榄香酮酸、3－羟基甘遂烷－7，24－二烯－21－酸、3－羰基甘遂烷－8，24－二烯－21－酸)溶出量显著增加。　　2.采用UPLC/Q－TOFMS联用技术分析乳香－没药效应部位中的化学成分，结果表明：从抗炎活性部位药对水提醇沉上清液的80％醇洗部位中鉴定出了7个化学成分，主要包括大环二萜、四环三萜、甾类化合物；从抗炎活性部位药对95％醇洗部位中鉴定出了12个化学成分，主要包括倍半萜、四环三萜酸、五环三萜、五环三萜酸类化合物；从抗炎活性部位药对40％醇洗部位中鉴定出了1个化学成分，为倍半萜类化合物。　　3.采用硅胶柱层析的方法对乳香.没药药对水煎液的80％醇沉上清液的乙酸乙酯部位进行分离和纯化，从该部位分离得到3个化合物，通过TLC、1HNMR、13CNMR鉴定，分别为：3－羟基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸(RM－175)、3－乙酰基氧基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸(RM－144)、3－羰基甘遂－8，24－二烯－21－羧酸(RM－214)。　　4、采用UPLC-MS/MS联用技术分析鉴定乳香.没药配伍前后汤液中的化学成分组成，采用逐步回归分析方法对汤液的理化参数与化学成分的相关性进行分析，结果表明：汤液中五环三萜酸酯类化合物与汤液的浊度呈显著正相关，倍半萜类化合物与汤液的黏度呈显著负相关。　　第五章基于UPLC/Q-TOFMS的佐剂性关节炎(AA)模型大鼠血浆和尿液代谢轮廓分析及乳香－没药的干预作用。　　1、血浆代谢轮廓分析：血浆代谢谱PCA分析结果表明正常大鼠与AA模型大鼠得到明显区分，说明AA模型大鼠机体代谢存在差异。经OPLS－DA分析的S－plot，寻找潜在的生物标志物。通过HMDB数据库检索，并参照文献数据，初步鉴定出14个具有显著分类意义的特征性生物标志物，其中6个表现为上调，8个表现为下调。乳香、没药、药对水提醇沉上清液干预后，对AA模型大鼠所致的代谢轮廓变化具有较好的回调作用。其中对7个生物标志物(LysoPC(17:0)，LysoPC(15:0)，LysoPE(20:2(11Z，14Z)/0:0)，LysoPE(20:1(11Z)/0:0)，LysoPE(18:1(9Z)/0:0)，LysoPC(18:2(9Z，12Z))，LysoPC(16:0/0:0))具有上调的作用；对3个生物标志物(丙氨酰色氨酸、反十八烯亚油酸、二十二碳六烯酸)具有下调的作用，且具有统计学差异。　　2、尿液代谢轮廓分析：尿液代谢谱PCA分析结果表明正常大鼠与AA模型大鼠得到明显区分，说明AA模型大鼠机体代谢存在差异。经OPLS-DA分析的S－plot，寻找潜在的生物标志物。通过HMDB数据库检索，并参照文献数据，初步鉴定出13个具有显著分类意义的特征性生物标志物，其中2个表现为上调，10个表现为下调。乳香、没药、药对水煎液的醇沉上清液干预后，对AA模型大鼠所致的代谢轮廓变化具有较好的回调作用。其中对10个生物标志物(4，6－二氢喹啉、丙二酰肉碱、N，N－二羟乙基甘氨酸、同型半胱氨酸硫代内酯、柠檬酸、溴异戊酰脲－谷氨酸、葡糖二酸、9’－羧基－γ－生育三烯酚、托吡酯、黄嘌呤核苷)具有上调的作用；对1个生物标志物(硫酸吲哚酚)具有下调的作用，且具有统计学差异。