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目的:本文主要研究低剂量表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)和姜黄素(Curcumin)对非小细胞肺癌(NSCLC)的协同抑制作用,并探讨其可能的分子机制。方法:以EGCG和姜黄素单独及联合作用处理非小细胞肺癌A549及NCI-H460细胞后,用MTT法观察两种药物对细胞的增殖抑制能力;流式细胞术检测细胞周期的分布情况;使用Ed U荧光染色观察细胞的DNA复制情况;提取细胞或肿瘤组织中的蛋白后,以Western Blot检测细胞周期相关蛋白的表达水平;平板克隆形成实验观察单个细胞的生存能力;将A549细胞接种于裸鼠体内,构建移植瘤模型,接瘤后腹腔注射给予EGCG和姜黄素治疗,验证两药联合在动物体内的作用效果。结果:在非小细胞肺癌细胞中,EGCG和姜黄素能够显著抑制肿瘤细胞的生长,在低剂量时,两药的联合指数(CI)在A549及NCI-H460细胞中分别为0.57713和0.67703,表现出协同抗增殖作用;EGCG和姜黄素联合处理后,细胞周期阻滞明显增强,周期阻滞主要发生在G1和S/G2期;EGCG和姜黄素联合作用能明显抑制细胞周期相关蛋白cyclin B1和cyclin D1的表达;Ed U荧光染色表明DNA复制受到显著抑制。平板克隆形成实验结果表明两种药物联合作用能显著地抑制细胞生长。在裸鼠A549细胞移植瘤模型中也得出了与体外实验相似的结果,EGCG和姜黄素联合作用能够减轻肿瘤负荷,肿瘤体积明显下降,且未观察到明显的毒副作用;对肿瘤组织切片的Ki-67增殖抗原免疫组化染色提示肿瘤的生长明显受抑。结论:低剂量的EGCG和姜黄素有协同抗肿瘤作用,在非小细胞肺癌的化学预防中具有良好的应用前景。目的:研究在非小细胞肺癌中,表没食子儿茶素没食子酸酯(EGCG)增强顺铂疗效的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:EGCG和顺铂单独及联合作用于非小细胞肺癌细胞后,以MTT法检测细胞生存率,并且在动物模型中验证两者在体内的作用效果;mi RNA芯片分析筛选EGCG处理前后存在差异表达的mi RNA,利用荧光定量PCR(q PCR)的方法检测细胞或肿瘤组织中相应mi RNA的表达情况;生物信息学分析筛选特定mi RNA可能的靶基因及相关信号通路,通过转染mimic或inhibitor构建mi RNA的过表达或低表达模型,以琼脂糖凝胶电泳检测潜在靶基因m RNA的表达水平。结果:在人非小细胞肺癌A549及LTEP-a-2细胞中,通过EGCG的预处理能够显著提升顺铂的疗效,细胞生存率明显下降,在裸鼠A549细胞移植瘤模型中也得到了相同的结论,顺铂对经EGCG预给药的荷瘤裸鼠的疗效最好;但在另一种人非小细胞肺癌NCI-H460细胞中,EGCG反而拮抗了顺铂的作用,使得顺铂疗效降低,且低剂量的EGCG能够显著促进NCI-H460细胞的增殖。mi RNA芯片分析显示hsa-mi R-98-5p及hsa-mi R-125a-3p两种mi RNA在A549及NCI-H460细胞中对EGCG的响应有所不同。通过转染mimic或inhibitor的方法构建特定mi RNA的过表达或低表达模型,在NCI-H460细胞中,使hsa-mi R-98-5p低表达,发现此时顺铂的疗效增加,并且同时观察到p53 m RNA水平的表达升高。通过生物信息学分析,实验同时发现,hsa-mi R-125a-3p可能对MAPK通路具有反向调节作用。结论:EGCG可能通过降低hsa-mi R-98-5p的表达水平,使p53表达增加而增强顺铂的疗效,提示hsa-mi R-98-5p可能作为一个治疗靶点从而提高临床非小细胞肺癌顺铂化疗的效果。另外发现hsa-mi R-125a-3p对MAPK通路的负调节可能是造成低剂量EGCG促进NCI-H460细胞增殖的原因之一。