三氧化二砷(As2O3)治疗哮喘作用机制的实验研究

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[目的] 1.研究哮喘小鼠肺内树突状细胞(DC)分布、募集的特点,及不同浓度三氧化二砷(As2O3)对其影响作用。2.研究小剂量As2O3对哮喘豚鼠肺内嗜酸性粒细胞(EOS)浸润、EOS凋亡和核因子-kB(NF-kB)表达的影响作用及其相关性,探讨小剂量As2O3治疗哮喘的可能机制。 [方法] 1.BALB/c小鼠50只随机分为5组,即对照组、哮喘组、低剂量(1mg/kg)、中剂量(5mg/kg)和高剂量(10mg/kg)As2O3治疗组。采用免疫组织化学染色技术检测小鼠肺、气道DC;扫描电镜分析DC形态;计算机图像分析技术对DC进行定量检测。2.豚鼠30只随机分为3组,即对照组、哮喘组和As2O3(2mg/kg)治疗组。采用TUNEL技术原位标记细胞凋亡;免疫组织化学染色技术检测豚鼠气道壁NF-kB;计算机图像分析技术对气道壁EOS浸润、EOS凋亡和NF-kB表达进行定量检测。 [结果] 1.对照组小鼠整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个NLDC-145+DC网络,DC密度从大气道到小气道分别为(500±50)个/mm2上皮面积到(60±10)个/mm2上皮面积(P<0.05),扫描电镜下DC呈典型的树突状形态;哮喘组小鼠肺内DC分布与对照组相似,但其密度较对照组显著增加(P<0.01);哮喘小鼠经As2O3处理后,肺内DC分布与哮喘组相似,但密度皆显著下降(P<0.01),且三种不同浓度砷剂处理组间无显著性差异(P>0.05)。2.对照组豚鼠支气管壁EOS计数为(4.4±2.5)个/HP,EOS凋亡指数(AI)为(0.42±0.08)%,整个肺组织包括气管、支气管、肺泡和脏层胸膜构成了一个NF-kB+细胞网络,其中支气管壁胞核NF- 南京医科大学硕士学位论文 x B”细胞密度为门 2 0 t 7 2)个加m‘上皮面积;与对照组 相比,哮喘组豚鼠支气管壁 EOS浸润显著增加(H 0.01), EoS凋亡指数显著下降(八0.of),胞核w-。B”细胞密 度显著增加(RO.01);哮喘豚鼠经 AS几处理后,支气 管壁 EOS浸润显著下降(HO.01),EOS凋亡指数显著增 加叶A0.of),胞核呷-。B“细胞密度显著下降(A0.OI), 但与对照组相比仍较高(HO.05),并且三组气道壁EOS 浸润 与 EOS 凋亡指数之间呈显著性负相关(r=-0.94和 刀.”,A0.of),Eos凋亡指数与胞核呷-。B”细胞密度 之间也呈显著性负相关(r=-0.93和-0.91,HO.01)。 [结论]1.树突状细胞在整个肺组织构成了一个完整 的 NLDC叶 5DC网络;下调肺内m密度,而不影响其肺 内分布,可能是虹;0;治疗哮喘的一个重要机制。2.EOS 凋亡异常是哮喘重要的发病机制之一;EOS凋亡异常与 NF-。B激活增力。密切相关;下调气道NF-。B激活细胞 数量,促进EOS凋亡,可能也是As几治疗哮喘的一个重 要机制。
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