地高辛是一种被广泛应用于治疗心脏病的强心苷药物,能够有效加强心肌收缩力、减慢心率和抑制心脏传导。地高辛的临床治疗窗口较狭窄,其毒性反应是临床治疗中常见且严重的问题。临床使用时必须快速有效监控其浓度,有助于医师及时调整不同患者的治疗剂量,以保证最佳治疗效果,避免无效治疗或中毒剂量。地高辛存在不稳定、纯化过程容易发生异构化和降解导致不稳等特点,且原料药中存在较多结构类似杂质。其制备纯化需要多种手段并用,才能制备出高纯原料药物,满足临床要求。本论文研制地高辛标准物质,为临床血清中地高辛含量测量提供溯源性物质保证。采用市售地高辛粗品为原料进行定性定量分析。首先利用红外光谱、核磁共振技术对地高辛原料进行定性确认,然后利用液相色谱-离子阱-飞行质谱对杂质定性分析,确定其中三种杂质为异羟洋地黄毒苷配基、双羟洋地黄毒苷和洋地黄毒苷。地高辛原料的液相色谱纯度为98.24%,并对质量平衡法所需参数:含水量,无机元素含量,挥发性有机溶剂残留量,不挥发性杂质进行了定值,经质量平衡法计算的地高辛原料的含量为97.94%。建立了柱层析法纯化技术:对地高辛原料进行分离纯化,研究硅酸镁、氧化铝、硅胶不同吸附剂,以及甲醇,二氯甲烷,丙酮,乙酸乙酯不同极性洗脱剂,通过正交实验考察了吸附剂填料高度、样品量、洗脱剂组成及其洗脱流速四个主要因素对于地高辛产品纯度的影响。实验优化确定了最佳层析实验条件为:以硅酸镁为吸附剂填料,乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇混合溶剂为洗脱剂的体系进行分析,进样浓度为3 mg·g-1,填料高度为20 cm,乙酸乙酯/二氯甲烷/甲醇比例为4:6:2(v/v/v),上样体积为7mL,洗脱流速为5mL·min-1,产品的液相纯度为99.07%,回收率为75.45%。利用半制备液相色谱法,对地高辛原料进行纯化分离,确定最优条件为:原料进样浓度为3 mg·g-1,采用乙腈-水为流动相梯度洗脱,检测波长220nm,流动相流速为12mL·min-1,进样体积为2mL,收集产品经冷冻干燥,所得产品的液相纯度为99.88%,回收率为25.79%。在室温避光和4℃下,地高辛产品在一个月的短期稳定性良好。有效避免制备过程存在的降解或异构化进程,研制具有国际先进水平高纯度标准物质,对其中的杂质进行准确定性。