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第一部分2015年我国17省市5岁以下腹泻患儿中星状病毒的分子流行病学研究目的了解2015年我国17省市5岁以下腹泻患儿中星状病毒感染的流行特征。明确2015年我国星状病毒的主要流行株型别,为星状病毒性腹泻的预防控制提供科学依据。方法收集2015年1~12月我国17省市4672份5岁以下腹泻患儿的粪便样本及相应临床信息,利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)反应进行星状病毒检测,并对部分星状病毒阳性RT-PCR产物测序并进行系统进化分析。采用描述性流行病学方法分析星状病毒的流行病学特征。结果星状病毒检出的阳性率约为3.40%。星状病毒感染阳性的患儿年龄主要集中在0~2岁;季节高峰在1月;流行地区主要位于西部及北部地区。52份星状病毒阳性标本,成功获得32株序列。31株为经典HAstV-1型星状病毒,1株为HAstV-5型星状病毒。结论星状病毒是我国5岁以下患儿腹泻的重要病毒性病原之一,HAstV-1基因型是我国星状病毒流行优势株。第二部分2015年我国GⅡ.3型诺如病毒流行株与受体的结合研究目的分析2015年我国GⅡ.3型诺如病毒流行毒株与受体组织血型抗原(Histo blood group antigens,HGBAs)的结合模式,探索GⅡ.3型诺如病毒在人群中长期广泛流行的原因,为GⅡ.3型诺如病毒性腹泻的防治提供重要的科学依据。方法1.在已收集到的2015年我国广东地区GⅡ.3型诺如病毒流行株的粪便样本中,选取1例阳性样本,提取RNA进行RT-PCR反应获得其ORF2区的基因序列;2.分别以其ORF2区和P区基因序列为基础构建p GEX-4T1-ORF2和p GEX-4T1-PP质粒;3.通过构建的质粒分别进行VP1蛋白和P蛋白的表达和纯化,获得GⅡ.3型诺如病毒的VP1蛋白和P蛋白,并对获得的VP1蛋白和P蛋白进行Western Blot实验验证目的蛋白的正确性及浓度测定;4.分别对获得的VP1蛋白和P蛋白进行以ELISA试验为基础HBGAs的特异性结合分析。结果成功构建了VP1蛋白和P蛋白的表达质粒pGEX-4T1-ORF2和p GEX-4T1-PP,Westren Blot试验表明相应蛋白获得成功表达,纯化后的蛋白浓度分别为0.54mg/ml和0.39mg/ml。唾液结合分析结果显示,阳性对照GⅡ.4型诺如病毒97-11毒株P蛋白与不同型别HBGAs结合的平均OD450值分别为A型(0.3957)、B型(2.7384)、O分泌型(0.3173)、O非分泌型(0.1171)。VP1蛋白与A、B、O分泌和O非分泌型唾液结合的平均OD450值均较低,最高值为0.2231,其他值均低于阳性临界值;P蛋白与A、B、O分泌和O非分泌型唾液结合的平均OD450值最高为0.9036,最低为0.0987。同等蛋白浓度下,其P蛋白与受体HBGAs的结合能力较VP1蛋白强(t=3.496,P<0.05)。此外,P蛋白与Lewis抗原阳性的A、B、AB和O分泌型唾液均有阳性结合,与Lewis抗原阴性的A、B、AB和O分泌型唾液以及O非分泌型唾液均无阳性结合。而且,不同型别的HBGAs间易感性无明显差异(c2=4.641,P>0.05)。结论相比于GⅡ.4型诺如病毒,2015年我国GⅡ.3型诺如病毒流行株与受体HBGAs的结合能力较弱。同等蛋白浓度下,P蛋白与受体HBGAs的结合能力强于VP1蛋白。此外,该GⅡ.3型诺如病毒毒株与A、B、AB和O分泌型HBGAs均有不同程度的结合,与O非分泌型无结合,且Lewis抗原为易感抗原。