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背景及意义卵巢癌是女性生殖器最常见的三大恶性肿瘤之一。卵巢癌起病比较隐匿、原发病灶不易被发现、癌灶容易扩散转移、首次发现已多为晚期，再加上化疗耐药及手术后容易复发等特点，卵巢癌患者的死亡率居妇科三大恶性肿瘤之首，5年生存率仅为30%。卵巢癌已成为严重威胁妇女健康和生命的主要妇科肿瘤。近年来，研究人员投入大量的精力试图阐明卵巢癌发生发展机制，虽然已经在卵巢癌的早期诊断方面取得了很大的进展，但目前卵巢癌的发病机制及耐药途径仍不是十分清楚。结肠癌转移相关基因1（metastasis-associated in colon cancer-1MACC1）是Stein等于09年通过全基因表达分析在结肠癌的原发灶和转移灶中发现的一个与结肠癌密切相关的基因。研究发现，MACC1在胃癌、肺癌、肝细胞癌、胰腺癌和卵巢癌等组织中出现异常高表达，促进肿瘤细胞的增殖、侵袭和转移，可作为评价其预后和转归的肿瘤标志物。肝细胞生长因子（hepatocyte growth factor，HGF），能促进多种肿瘤细胞的生长、转移、粘附及侵袭，而HGF/C-met信号通路中调节met基因的关键因子是MACC1基因。目前，MACC1在卵巢癌化疗耐药细胞株的表达是否异常，MACC1的异常表达导致卵巢癌耐药细胞对化疗药物顺铂（cisplatin，DDP）的敏感性如何变化等问题仍然不是很清楚。目的检测MACC1基因在顺铂耐药细胞株SKOV-3/DDP及其亲本敏感细胞株SKOV-3中的表达差异，探讨以MACC1基因为靶向的RNA干扰后能否有效逆转SKOV-3/DDP细胞对DDP的耐药性。材料和方法1.采用逆转录（RT）-PCR和蛋白印迹（Western blot）法检测MACC1mRNA和蛋白在SKOV-3/DDP及SKOV-3细胞中的表达差异。2. siRNA转染至SKOV-3/DDP，RT-PCR和Western blot法检测转染后各组细胞中MACC1的表达。3. MTT法检测转染细胞对顺铂的耐药性情况。4.流式细胞学检测顺铂加药前后各组细胞的凋亡情况。5.采用SPSS16.0统计学的软件进行统计学分析。计量资料结果用平均值±标准差（X±s）表示，沉默前两数据之间采用成组t检验，而沉默之后的各组细胞mRNA、蛋白、细胞存活率及凋亡率之间的数据采用单因素方差分析。以P <0.05为差异有统计学意义。结果1. SKOV-3/DDP细胞中MACC1mRNA的相对表达量是SKOV-3细胞的(2.66±0.54)倍,蛋白表达量是SKOV-3细胞的(1.95±0.45)倍,差异均有统计学意义(P <0.05),表明MACC1在卵巢癌DDP耐药细胞株SKOV-3/DDP中的表达较亲本细胞株SKOV-3明显升高。2.以未转染组SKOV-3/DDP细胞MACC1的表达水平为100％，shRNA转染组SKOV-3/DDP-shMACC1细胞MACC1的mRNA水平下降(83.39±1.26)％，蛋白水平下降（82.25±2.94）％，两组差异有统计学意义(P<0.05)。空质粒转染组SKOV-3/DDP-shVector细胞MACC1的RNA和蛋白水平是未转染组SKOV-3/DDP细胞表达水平的(104.55±6.35)％和（105.66±5.98）％，两组差异无统计学意义(P>0.05)。表明以MACC1基因为靶向的shRNA能有效而特异地沉默MACC1基因，抑制MACC1的表达。3.与未转染SKOV-3/DDP细胞、空质粒转染组SKOV-3/DDP-shVector细胞相比，SKOV-3/DDP-shMACC1细胞与顺铂孵育后的细胞抑制率明显升高；SKOV-3-shMACC1细胞对顺铂的IC50为(26.09±0.91) μmol／L，与未转染组细胞(47.50±0.40) μmol／L、SKOV-3-shVector细胞(47.08±0.45) μmol／L比较，差异有统计学意义(P<0.05)；SKOV-3-shVector细胞与未转染组细胞比较，差异无统计学意义(P>0.05)。说明MACC1表达下调后，在卵巢癌中能增强顺铂的抗肿瘤作用。4. MACC1-shRNA转染组SKOV-3/DDP-shMACC1细胞凋亡率为（13.77±0.60）%，与空质粒转染组SKOV-3/DDP-shVector细胞凋亡率（4.23±0.30）%及未转染组SKOV-3/DDP细胞凋亡率（3.63±0.30）%相比明显升高，差异有统计学意义（P<0.05）。而空质粒转染组与未转染组相比，差异无统计学意义（P>0.05）。说明MACC1表达下调后，会引起卵巢癌细胞发生部分凋亡，若继续加以顺铂作用后，其早期凋亡率会显著升高。结论1. MACC1基因在SKOV-3/DDP细胞中的表达明显升高。2.沉默MACC1基因能有效逆转SKOV-3/DDP细胞对顺铂的耐药性。