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目的:通过对壮药山风的抗炎、止血、镇痛的药理活性部位的筛选,确定其活性部位的相关药理作用,为进一步对其活性部位的化学成分的分离纯化奠定了基础,为研制新型的药物牙膏提供参考,同时也扩大了壮药的应用范围和加快了其产业化的速度。
方法:用乙醇提取、浓缩,分别用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇进行萃取得山风提取物不同极性部位。再分别通过对小鼠出血和凝血时间的影响来筛选止血有效部位;通过小鼠耳廓肿胀实验和大鼠足趾肿胀实验来筛选抗炎有效部位;通过醋酸所致的小鼠扭体反应实验和热板法所致镇痛反应的实验来筛选镇痛有效部位。将壮药山风和山芝麻的有效部位及其复配物添加到牙膏基质中,作为受试样品,以牙膏基质作为空白对照组,通过机械损伤致小鼠肝脏出血模型分别进行止血测定,通过二甲苯致小鼠耳廓肿胀模型进行抗炎测定,通过醋酸引起小鼠扭体反应模型进行镇痛测定。
山风石油醚部位化学成分的分离:在制备薄层板上经石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯(10∶1.5∶1)系统进行二次分离后,在紫外下把含量较高的一条亮绿色的硅胶色带(其Rf值为0.51)刮下,并用相同的方法对此色带进行富集,把富集的硅胶用石油醚-二氯甲烷-乙酸乙酯的混和溶剂进行超声溶解,减压回收溶剂并将解吸混合物进行柱层析分离。
结果:山风正丁醇部位和乙酸乙酯部位均能缩短小鼠出血时间和小鼠凝血时间,具有止血作用;山风石油醚部位和水部位均能抑制大鼠的足趾肿胀程度具有抗炎作用,而水部位还具有抑制小鼠耳廓的肿胀程度;山风四个部位均可降低醋酸所致的小鼠扭体反应次数,具有镇痛作用,正丁醇部位还可以延长小鼠舔后足时间;山芝麻正丁醇部位组、山芝麻正丁醇部位与山风正丁醇部位混合组在对抗二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀明显抑制作用;而山风正丁醇组对抗二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀无明显抑制作用。山芝麻正丁醇部位组、山芝麻正丁醇部位与山风正丁醇部位混合组对醋酸引起的小鼠疼痛有明显的缓解作用和明显缩短机械损伤致小鼠肝脏出血时间;药1-7组在对抗二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀均具有明显抑制作用,均能明显缩短机械损伤致小鼠肝脏出血时间,且均对醋酸引起的小鼠疼痛有明显的缓解作用。药3、4在对抗二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀、机械损伤致小鼠肝脏出血时间方面与云南白药牙膏作用相当,其中均以3组作用最为明显。药1-7组在对醋酸引起的小鼠疼痛作用的缓解方面与云南白药牙膏作用相当,其中以7组作用最为明显,表明山风和山芝麻两者一起混合配比使用具有一定的协同作用。
亮绿色的色带上的解吸物质经柱层析分离后分别在石油醚-乙酸乙酯(55∶1),(30∶1),(25∶1)洗脱系统下得到进一步分离。结论:壮药山风的止血活性部位是正丁醇部位和乙酸乙酯部位、抗炎活性部位是石油醚部位和水部位、镇痛活性部位是乙醇部位和正丁醇部位。山风正丁醇部位可应用于牙膏工业中,并且山风正丁醇部位和山芝麻正丁醇部位两者的复配应用于牙膏中具有一定的协同作用,山风正丁醇部位与山芝麻正丁醇部位复配药牙膏的最佳配比为1∶2。