乳腺癌是女性最多发的一种癌症,其死亡率逐年增加,而乳腺癌致死的主要原因是癌细胞的转移,目前对乳腺癌转移的研究已经成为乳腺癌研究的热点。上皮细胞-间质细胞转化(EMT)是近些年被大家接受的乳腺癌转移模型。上皮型钙粘蛋白(E-cadherin)是EMT的典型标志物,在EMT过程中,E-cadherin表达下调或缺失,所以E-cadherin的下调被认为是与乳腺癌浸润和转移正相关。然而在临床检测中,该基因在许多乳腺癌转移灶表现为高表达,因而其在乳腺癌发展及转移中的作用需要进一步深入的探讨。本文利用高表达E-cadherin并且高转移性小鼠乳腺癌细胞4T1为模型,通过构建E-cadherin基因(CDH1)启动子驱动的双荧光蛋白报告基因载体,采用流式细胞仪分选的方法分选出E-cadherin表达阳性和阴性细胞,进而对分选的细胞进行体外培养观察细胞的形态特征与差异,也为进一步研究两种不同细胞亚群的生物学行为建立基础。结果如下,激光共聚焦显微镜检查结果表明CDH1启动子驱动的双荧光蛋白报告基因载体构建成功,流式细胞仪分选后E-cadherin阳性和阴性细胞体外培养表现出明显差异,主要为CDH1阴性细胞达到一定聚合度之后,分布于细胞群中间区域的细胞开始漂浮、逃离,而CDH1阳性细胞却无此现象,这说明E-cadherin的缺失是乳腺癌转移的必要不充分条件。对CDHl转录起始位点上游1000bp分析发现有在脑胶质瘤中高表达的p53的结合位点,并且对E-cadherin有正向调控作用,推测这可能是乳腺癌脑转移瘤中高表达E-cadherin的原因。