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大豆孢囊线虫(Soybean Cyst Nematode,SCN)病是世界上给大豆生产造成严重危害的病害,我国大豆孢囊线虫病病原的4号生理小种是所有生理小种中致病力最强的小种。因此研究大豆孢囊线虫4号生理小种抗性的遗传机制以及对抗性基因进行分子标记定位,对我国大豆抗孢囊线虫病育种具有重要意义。 应县小黑豆是我国山西省农家品种,对大豆孢囊线虫4号生理小种表现为良好的抗性。本研究以应县小黑豆×汾豆50组合F2群体为试验材料,利用塑料钵柱法进行抗性鉴定,对大豆孢囊线虫4号生理小种抗性基因进行遗传分析,并利用群分法(Bulked Segregant Analysis,BSA)结合SSR和ISSR标记技术对抗性基因进行分子标记筛选和定位,旨在实现大豆孢囊线虫抗性育种中亲本和杂交后代的分子标记辅助选择。主要研究结果如下:1.本研究应用标准品种法和绝对孢囊数法作为抗性评价标准进行大豆孢囊线虫4号 生理小种抗性鉴定验证分析,得到在应县小黑豆×汾豆50F2群体中中应县小黑 豆对大豆孢囊线虫4号生理小种抗性是由1对或2对隐性基因(rhgX)控制的, 研究结果和前人的研究结果是一致的,表明应县小黑豆×汾豆50F2群体应用与 分子标记是可行的。通过对F2代农艺性状考种与统计分析,深色种皮(Qingse) 与SCN抗性基因连锁。2.分别应用SSR标记技术和ISSR标记技术筛选到两个与SCN 4号生理小种抗性 基因rhgX连锁的分子标记:Satt038和Issr811。Satt038标记片段大小为180bp 和185bp,为共显性标记,在两个F2群体中的分离比为1:2:1;Issr811标记 的片段大小为350bp,为显性标记,在两个F2群体中分离符合1:3的分离比。 两个分子标记在F2群体中均呈孟德尔式遗传。3.通过遗传连锁分析,Satt038标记与SCN抗性基因rhgX遗传距离为26.9cM; Issr811标记与rhgX的遗传距离为10.2cM;形态标记Qingse与rhgX的遗传距离 为35.2cM。分子标记Satt038、Issr811及Qingse与分离群体中SCN抗性鉴定结 果符合率分别为98%、90%及75%。分析表明分子标记Satt038和Issr811具有 分子标记辅助选择应用前景。4.根据Satt038在大豆连锁图上的位置,将抗性基因rhgX定位于大豆分子连锁群 G(MLGG)上,初步推断rhgX是不同于已知rhg1的一个新的SCN抗性位点。 rhgX基因与标记位点在分子图谱上的顺序为Satt038—rhgX—Issr811—Qingse。