目的:通过体外和体内研究观察蜂毒素对人骨肉瘤143B细胞增殖和迁移的抑制作用并探讨其作用机理,为蜂毒素治疗骨肉瘤提供可靠的实验依据。方法:1.体外研究:1)CCK-8法检测蜂毒素对骨肉瘤143B细胞增殖的影响;2)划痕愈合实验和Transwell小室实验检测蜂毒素对骨肉瘤143B细胞迁移能力的影响;3)流式细胞技术检测蜂毒素对骨肉瘤143B细胞凋亡的影响;4)Realtime RT-PCR及Western blot检测分别观察蜂毒素对骨肉瘤143B细胞Wnt/β-catenin信号转导通路中的关键因子LRP5、β-catenin、c-Myc和Survivin m RNA和蛋白水平的影响。2.体内研究:建立裸鼠胫骨骨肉瘤移植模型,观察蜂毒素对裸鼠移植瘤生长,通HE染色法观察各组骨肉瘤组织形态,应用免疫组织化学法检测各组裸鼠瘤体内LRP5、β-catenin和Survivin蛋白水平表达。结果:1.体外实验:蜂毒素能明显抑制143B细胞的增殖作用,该抑制作用可随药物浓度的增加而增大。划痕愈合实验显示蜂毒能明显抑制骨肉瘤细胞划痕的愈合率,并随蜂毒素浓度的增加愈合率减小,而Transwell实验显示蜂毒素能明显抑制骨肉瘤细胞的迁移率,随着蜂毒素浓度的增大迁移入下室细胞数量减少。流式细胞技术实验显示蜂毒素能明显促进骨肉瘤细胞的凋亡,随着蜂毒素浓度的增大细胞凋亡率增高。Realtime RT-PCR和Western blot实验显示,蜂毒素能显著下调143B细胞中LRP5、β-catenin、c-Myc和Survivin m RNA及蛋白表达。2.体内实验:蜂毒素能不同程度抑制裸鼠胫骨移植瘤的生长,中剂量和高剂量组的作用更为明显。HE染色结果显示,经蜂毒素处理后的瘤体组织出现不同程度的细胞核固缩;同时免疫组织化学检测结果显示,与对照组比较,蜂毒素不同剂量治疗组瘤体组织中LRP5、β-catenin和Survivin表达水平均有所下降。结论:蜂毒素可能通过调节Wnt/β-catenin信号转导通路相关因子表达体外抑制人骨肉瘤143B细胞的增殖、迁移,诱导细胞凋亡;体内抑制裸鼠胫骨移植瘤的生长作用。