目的：建立体液（斑）的紫外-可见吸收光谱（ Ultraviolet–visible Spectroscopy ，UV-Vis ）和表面增强拉曼光谱（ Surface-Enhanced Raman Spectroscopy，SERS）分析技术，调查血液（斑）等法医物证斑痕的光谱差异，评价通过现场生物光谱分析进行法医物证斑痕鉴别的可行性。　　方法：　　1．法医物证斑痕的UV-Vis吸收光谱法　　把体液（斑）用纯水进行稀释或浸提，振荡离心后取上清 2?L，用FLA6000 微量分光光度计扫描，获得 UV-Vis 吸收光谱。光谱数据用 Origin 8.0进行处理、分析和作图。优化选择合适的预处理措施、上样量和光谱扫描参数，建立体液的微量 UV-Vis 光谱分析技术。梯度稀释法确定方法的灵敏度、检测限。调查血液、唾液、精液、尿液等常见体液的微量 UV-Vis 吸收光谱，样本光谱数据用Past3软件进行主成分分析(Principal Component Analysis，PCA)和线性判别分析(Linear Discriminant Analysis，LDA)，评价微量 UV-Vis 吸收光谱用于体液鉴别的可行性。调查卫生纸、纱布、玻璃等常见载体上的斑痕，以及不同陈旧度的斑痕，评价载体、形成时间等对微量 UV-Vis 吸收光谱法斑痕鉴别的影响。　　2．法医物证斑痕的SERS光谱法　　把体液、体液稀释液，或体液斑的浸洗液，用饱和 NaCl 盐析等方法进行预处理，离心后取上清与等体积纳米金胶增强剂混匀，用移液器取 2~10?L 滴加至铝箔纸、玻片等载体上。室温自然蒸发过程中，用简智 SSR-200 型便携式拉曼光谱仪采集光谱，直至液滴变干。光谱数据用 NGSLabspec 进行去背底、平滑、归一化等处理，Origin8.0 作图。优化选择合适的预处理措施、纳米金胶比例，光谱测量载体、光谱扫描参数和扫描时机，建立体液的便携 SERS 光谱分析技术。梯度稀释法确定方法的灵敏度、检测限。平行样本、不同时间重复测量，验证方法的稳定性。调查血液、唾液、精液、尿液等常见体液的便携 SERS光谱，样本光谱数据用 Past3 软件进行 PCA-LDA 分析，评价便携 SERS 光谱法用于体液鉴别的可行性。调查卫生纸、纱布、玻璃等常见载体上的斑痕，评价载体对便携SERS光谱法斑痕鉴别的影响。　　结果：　　1．法医物证斑痕的UV-Vis吸收光谱鉴别　　体液的纯水稀释液，或体液斑的纯水浸洗液，离心后的上清，用 FLA6000 微量紫外-可见分光光度计的蛋白模式（光谱范围200~850nm，积分20/50，基线校正 625nm，增益 3）测量，获得了 UV-Vis 吸收光谱。2?L 上样时的灵敏度排序为（稀释倍数）：血液（512）＞精液（128）＞尿液（64）＞唾液（32）。　　血液在 230、275、345、415、540 和 575nm 处可见吸收峰；精液在 225 和265nm 处有吸收峰；尿液在 205、225 和 285nm 处有吸收峰；唾液在 280nm 处有吸收峰。对 4 种体液的光谱数据（n=5）进行 PCA 分析，前 3 个主成分的合计贡献率高于 99.99%。在 PCA 三维散点图中，不同体液分布在不同空间，同类体液相对集中分布，可以与其他体液区分开来。LDA 判别，仅 1 例尿液误判为唾液，准确率为95%。　　纱布、卫生纸、玻璃，泥土等载体对斑痕的 UV-Vis 光谱影响不大。1 周内的纱布血斑，575nm 与 560nm 处的吸光度差值，△Abs（575-560）与血斑陈旧度呈负相关（Y= -0.0246X+ 1.1943，R2=0.8205）。3个月的陈旧斑痕，血斑345、540 和 575nm 处的吸收峰消失，唾液斑 280nm 处吸收峰已较难辨别，精斑的特征峰尚可。不同体液 1:1 混合时，吸收光谱以其中的强吸收体液为主，顺序为血液＞精液＞尿液＞唾液。　　2．法医物证斑痕的SERS光谱鉴别　　用稀释、盐析等方法预处理的体液样品，均可得到相似的SERS光谱。但盐析法的谱峰强度、清晰度和速度等方面均优于其他方法。以纳米金胶为增强剂的SERS 光谱显著强于普通拉曼光谱。以铝箔纸为载体时，对样品光谱的干扰最小。点样后在蒸发过程中连续多次检测，样品光谱逐渐增强，以干燥后最强。可检出稀释500倍甚至1000倍的体液，检测限达?L级，且可以稳定的重复。　　各种体液的主要便携 SERS 拉曼峰（ cm-1 ）分别为，血液（ 480、669、907、1016、1132、1221、1435、1584）、精液（480、720、962、1013、1129、1219、1443、1584、2119）、唾液（444、730、1001、1440、1578、2121）尿液（663、895、998、1581和2119）。样本（血、尿、唾液，n=10；精液n=6）光谱数据的PCA分析，前 3个主成分的合计贡献率高于 99.99%。在 PCA三维图中，不同体液分布在不同空间，可以相互区分开来。LDA判别准确率为100%。纱布、卫生纸、玻璃等载体上的体液斑痕，在浸洗后测到的SERS光谱与同类体液的特征光谱基本相同，不影响鉴别。　　结论：血液、精液、唾液和尿液的 UV-Vis 吸收光谱和 SERS 光谱各有其特征，可用于体液（斑）组织来源的鉴别。两种生物光谱法均以小型便携设备为基础，简单、快速，且有较高灵敏度和检材适应性，有望用于法医物证斑痕的现场鉴别。