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食管癌是全球最常见的消化道肿瘤之一,恶性程度较高,而且莸国的食管癌发病率和死亡率居全球首位,其中食管鳞癌是最多发的组织学类型,大约占90%以上。食管癌的发病机理和病情的发展涉及多个基因的改变,研究这些基因在食管癌发病过程中的变化对阐明该疾病的发病机制具有重要意义。 人类的原癌基因C-ErbB2,又称neu或HER-2基因,位于人染色体17p21带上,编码分子量为185 KD的具有酪氨酸蛋白激酶活性的细胞跨膜糖蛋白,参与细胞分裂、增殖、信号转导及肿瘤生长调控等过程。现有研究结果表明,在肿瘤发病后期,C-ErbB2的过度表达能够促使有丝分裂,使某些异常的细胞不受机体控制而产生独立生长的能力,因此该基因与许多肿瘤的侵袭和转移关系密切。 RNA干扰技术(RNAi)是通过高度保守的双链RNA(dsRNA)诱导的同源信使RNA(mRNA)特异性高效降解,并导致mRNA翻译的蛋白合成降低,因此也被称为转录后基因沉默(PTGS)。该技术能够选择性剔除或沉默特定基因的表达,在基因功能研究和恶性肿瘤靶向基因治疗领域发挥着重要作用。通过该技术可以选择性抑制肿瘤细胞内异常基因的表达,使突变基因恢复正常功能,提高肿瘤细胞对治疗药物的敏感性,同时还可以筛选出治疗肿瘤的有效基因靶点。 目的:对人类食管鳞癌细胞EC9706中C-ErbB2基因的表达和功能进行初步研究,探讨C-ErbB2作为治疗食管鳞癌靶向基因的可能性。 方法:设计人类C-ErbB2基因的siRNA,转染表达C-ErbB2基因的食管鳞癌细胞EC9706。通过半定量PCR和Western Blot分别从基因和蛋白水平检测C-ErbB2的沉默效果,利用细胞增殖实验检测C-ErbB2基因被成功沉默后,对食管鳞癌细胞EC9706增殖的影响。 结果:设计的C-ErbB2基因的siRNA转染食管鳞癌细胞EC9706后,通过RT-PCR在基因表达水平上检测到C-ErbB2基因的表达量明显下降;通过Western Blot在蛋白水平上检测到C-ErbB2蛋白的表达量也明显降低;细胞增殖实验显示,C-ErbB2基因沉默后,细胞的增殖受到抑制。 结论:研究结果提示C-ErbB2的表达水平与食管鳞癌细胞的增殖相关,C-ErbB2基因沉默后,细胞的增殖受到抑制。因此,通过RNA干扰技术靶向作用于C-ErbB2可能会发展成为一种治疗食管癌和其它癌症的方法。