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益生菌是一类对宿主有益的活性微生物,其具有调节肠道菌群、抗氧化、降血脂等作用。为获得具有益生特性的乳酸菌菌株,本研究对分离自蒙古国牧区酸马奶样品中的197株乳酸菌进行耐酸、耐胆盐、耐模拟人工胃肠道等生物学特性的筛选及鉴定,并将筛选所得的菌株制备发酵乳,对其进行抗氧化活性、抑制ACE活性的测定和调节小鼠肠道菌群的研究,为今后益生菌的开发和利用提供优良菌株。具体结果如下:1.潜在益生作用乳酸菌的筛选及鉴定。(1)通过耐酸(pH 2.0、pH 2.5、pH 3.0)和耐胆盐试验筛选出12株耐酸性能较强的菌株,用于后续试验。(2)在模拟人工胃肠液试验中,12株菌显示不同的耐受能力。在人工胃液处理3 h的存活率在22.81%～95.86%之间,其中菌株2-32和菌株2-33的存活率分别为80.64%和95.86%。选择存活率大于60%的菌株共5株(分别为2-7、2-13、2-20、2-32、2-33)进行模拟人工肠液试验(处理4 h和8 h后)得知,5株菌的活菌数均保持在109～1010 CFU/mL之间,存活率均在50%以上。通过细胞表面疏水能力测定,这5株菌均具有一定的粘附能力,其中菌株2-33的疏水能力最高,为42.61%,其余4株菌均低于10%,因此选取菌株2-33作为目的菌株。(3)在10种抗生素的体外药物敏感试验得知,菌株2-33对诺氟沙星、头孢拉定、庆大霉素、万古霉素以及链霉素有耐药性,不敏感;对克林霉素中度敏感;对四环素、氯霉素、红霉素、氨苄西林敏感。(4)通过糖类发酵试验以及16S rDNA基因序列分子鉴定,将菌株2-33鉴定为植物乳杆菌,其获得的基因序列长度为1432 bp,登录号为MN611708。2.用植物乳杆菌2-33制备发酵乳测定其乳清抗氧化活性以及抑制ACE活性。(1)通过抗氧化能力的测定,菌株2-33发酵乳乳清的总抗氧化能力为0.23±0.01 mmol硫酸亚铁的总抗氧化能力,略低于0.03 mg/mL Vc溶液的抗氧化能力;还原能力略低于0.1 mg/mL Vc溶液的还原能力,吸光度值为0.68±0.01;清除DPPH和O2-的能力分别达到72.80±0.30%和21.32±0.50%;其ACE抑制率为 1.98±0.09%。3.通过灌胃植物乳杆菌2-33发酵乳来测定小鼠食物利用率、脏器指数以及肠道菌群。(1)通过灌胃植物乳杆菌2-33发酵乳发现小鼠在总摄食量上,发酵乳低剂量组(0.1 ml,1×109 CFU/mL)每周摄食量为274.90±18.95 g,显著高于对照组、模型组和高剂量组(0.3ml,1×109CFU/mL)(P<0.05);在小鼠肝脏指数上,高剂量组显著高于对照、模型组和低剂量组(p<0.05);从肾脏指数看,添加植物乳杆菌2-33发酵乳灌胃后,提高了小鼠的肾脏指数,提高程度:高剂量组>低剂量组>模型组>对照组,高剂量组与低剂量组相比差异显著(P<0.05),低剂量组与模型组和对照组相比差异显著(P<0.05);从脾脏指数看,植物乳杆菌发酵乳提高了小鼠的脾脏指数,高剂量组显著高于对照组、模型组和低剂量组(P<0.05)。(2)通过灌胃植物乳杆菌2-33发酵乳15d后,发酵乳高剂量组和发酵乳低剂量组的乳杆菌数量和双歧杆菌数量均显著高于模型组(P<0.01);发酵乳低剂量组和高剂量组的肠杆菌数量均显著低于模型组(P<0.05);发酵乳高剂量组的肠球菌数量显著低于模型组(P<0.01),但低剂量组的肠球菌数量与模型组相比,无显著差异(P>0.05);发酵乳高剂量组和低剂量组的产气荚膜梭菌数量显著低于模型组(P<0.01);因此,植物乳杆菌2-33发酵乳对联合抗生素溶液使肠道菌群失调的小鼠有明显的调节作用。该研究结果对益生菌的开发和利用提供优良菌种,具有较好的应用前景。