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乳腺癌对人类健康的影响已经日益加剧,其发病率和致死率都在逐年上升,已经成为威胁妇女健康的“头号杀手”,针对乳腺癌的治疗研究也引起了人们的广泛重视。癌细胞较强的抗药性以及侵袭能力致使针对癌细胞的治疗方法存在较大的阻碍。因此,抗肿瘤研究逐步从癌细胞本身转移到能为其提供营养物质的肿瘤微环境,通过调控肿瘤微环境的信号通路,从而抑制癌细胞的发生发展。成纤维细胞是肿瘤微环境中含量最丰富的基质细胞,在癌细胞的增殖、迁移以及血管生成中都发挥着不可或缺的作用。Atg7是一种自噬相关基因,在介导自噬-溶酶体形成过程中发挥着重要作用。研究表明atg7在肿瘤发生发展中发挥着双重作用,既充当抗癌基因的角色,又行使癌基因的职能。然而,Atg7在成纤维细胞中行使的功能还没有得到广泛的研究。因此,本文将主要探讨成纤维细胞中atg7行使的功能以及对肿瘤发生发展的影响。在体外条件下,提取atg7缺失的成纤维细胞以及野生型成纤维细胞的培养上清,将提取的上清1:1混合正常培养基后处理人源的乳腺癌细胞系MDA-MB-231和鼠源的乳腺癌细胞系4T1,发现atg7缺失的成纤维细胞相比野生型成纤维细胞(Wild Type Mouse Embryonic Fibroblast,WT MEF)明显可以促进癌细胞的增殖和迁移能力。Atg7缺失的成纤维细胞形态相比野生型成纤维细胞表现出肿瘤相关的成纤维细胞(Cancer Associated Fibroblasts,CAFs)的特性如轮廓更为清晰、细长,且多为突起的纺锤形。因此,通过检测CAFs的标记物α平滑肌肌动蛋白(α SmoothMuscleActin,α-SMA)和促肿瘤生长因子的表达情况,发现atg7缺失的成纤维细胞中α-SMA蛋白以及TGF-β家族、MMP家族等促癌因子明显上调。检测atg7缺失的成纤维细胞培养上清中促癌因子的表达情况,发现atg7缺失的成纤维细胞分泌大量的基质金属蛋白酶(Matrix Metalloproteinases,MMPs)促进乳腺癌细胞恶化。因此,通过以上实验,我们发现成纤维细胞中的atg7发挥着抑癌作用,当成纤维细胞中的atg7被敲除以后,正常的成纤维细胞将表现出CAFs的特性,通过分泌促癌因子,尤其是MMPs从而增强乳腺癌细胞的迁移能力。MMPs是一种依赖于Zn2+离子的基质金属蛋白酶,在组织重建、器官形成和炎症的发生中均发挥着重要的作用。研究表明MMPs通过降解细胞外基质,可以协助癌细胞的转移过程。体外实验表明atg7缺失的成纤维细胞促进乳腺癌恶化的过程中,MMPs发挥着重要的促进作用。但是关于MMPs对乳腺癌病人预后的影响还有待进一步探索,因此,本文接下来运用Meta分析的方法探究临床乳腺癌患者中MMPs的表达情况与病人预后存活率之间的关系。分析结果表明:不管是在单因素还是多因素水平下,MMPs阳性的乳腺癌患者会降低其预后总存活率以及无复发存活率。通过分析MMPs家族中的分子,发现MMP9阳性的患者其预后总存活率也明显降低。但是,目前的临床数据表明MMP9与预后无复发存活率之间没有相关性。因此,本文通过实验部分以及Meta分析部分表明atg7缺失的成纤维细胞表现出CAFs的性质,通过分泌MMPs促进乳腺癌细胞的恶化,确定了 MMPs的促肿瘤功能,对于以肿瘤微环境为靶点治疗策略提供了新的思路。