【摘 要】
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如今,食品安全问题已成为制约经济发展的关键因素,在物质水平提高的同时,人们开始追求更加绿色环保的健康饮食习惯。而真菌毒素（Mycotoxin）作为食品中常见的污染物已严重威胁人体健康。玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEA）是一种真菌毒素,主要污染粮食作物如玉米、小麦、高粱以及牲畜饲料和少数的奶类制品。其化学性质稳定,在食品或饲料加工中不易被破坏。目前,有效的检测和严格的监管是保障食品安全的
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如今,食品安全问题已成为制约经济发展的关键因素,在物质水平提高的同时,人们开始追求更加绿色环保的健康饮食习惯。而真菌毒素（Mycotoxin）作为食品中常见的污染物已严重威胁人体健康。玉米赤霉烯酮（Zearalenone,ZEA）是一种真菌毒素,主要污染粮食作物如玉米、小麦、高粱以及牲畜饲料和少数的奶类制品。其化学性质稳定,在食品或饲料加工中不易被破坏。目前,有效的检测和严格的监管是保障食品安全的主要手段。随着现代检测技术的不断提高,常用的检测方法主要包括免疫测定法和仪器分析法两大类。而在免疫测定法中酶联免疫吸附测定法因其操作简单,检测时间短、检测成本低等优点已成为一种主要的检测方式。但此种方法的核心产品为ZEA单克隆抗体,而抗体存在制备繁琐、不能批量合成、价格昂贵等问题,若使用某种简便的手段,在不失其检测特异性的前提下,获得ZEA特异性亲和配体,在一定程度上能够替代单克隆抗体,弥补上述不足,则更具有现实意义和使用价值。本文以ZEA为靶分子,经噬菌体表面展示技术进行三轮筛选获得与ZEA特异性结合的重组噬菌体,通过ELISA鉴定其结合活性、提取ss DNA、测序及翻译,同时利用计算机模拟技术对靶分子与筛选所得结合肽进行分子对接,最终获得一条目标结合肽:G-W-H-V-H-S-H-R-F-A-S-I,该结合肽在以往的研究中尚无报道。采用多肽固相合成技术对该结合肽进行合成,利用生物标记技术从多种标记物中选择一种生物小分子-生物素（Biotin）于C端进行标记,最终成功制得一种检测ZEA的新型生物探针:G-W-H-V-H-S-H-R-F-A-S-I-G-G-G-G-S-K（Biotin）。经检测,此生物探针与ZEA具有良好的亲和性及特异性,进而以此生物探针为核心产品初步建立一种检测ZEA的新方法,建立了检测ZEA的标准曲线:y=0.2306x+0.1417,R~2=0.9948,并用于含有靶心值样本的实际检测。将实际检测结果与样本靶心值进行比对分析后,结果显示该探针在一定程度上可替代价格昂贵、制备复杂的ZEA单克隆抗体。该方法对ZEA具有较好的检测效果,能够实现快速、灵敏、特异、低成本检测ZEA的目的。本文研究可为建立基于结合肽的检测ZEA生物学新方法提供思路与指导。
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