笼养疣鼻天鹅繁殖期行为时间分配及CHD基因法性别鉴定

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疣鼻天鹅(Cygnus olor)是国家二级保护动物,濒危动物红皮书列为易危(V)动物,近年来,在野外种群数量有明显下降趋势。2011年1月至6月,用瞬时扫描法对浙江萧山珍禽养殖场的疣鼻天鹅进行了观察和数据分析。研究发现,疣鼻天鹅在繁殖期的行为时间分配存在明显的性别差异。雌(雄)性在繁殖期重要行为的时间分配为:筑巢9.84%(雄4.67%),繁殖75.41%(雄4.14%),采食2.58%(雄7.85%),理羽4.00%(雄10.39%),站立1.52%(雄15.48%),游走0.52%(雄4.26%),警戒0.90%(雄3.93%),休息2.77%(雄30.74%),游泳2.23%(雄16.55%),洗澡0.24%(雄2.00%)。对不同性别疣鼻天鹅的时间分配进行独立样本T检验,结果显示:繁殖期雌雄疣鼻天鹅除在理羽行为上差异不显著(P>0.05)外,其他行为都存在差异显著(P<0.05),在繁殖、站立、游走、休息、游泳及洗澡行为上差异极显著(P<0.01)。通过不同天气条件的比较,表明疣鼻天鹅不仅在行为时间分配上不同,而且不同性别在行为时间分配上也存在明显差异。由于疣鼻天鹅为单态性鸟,雌雄在外形上十分相似,很难直接判定性别,在繁殖育种时常会发生人为错配的现象。本研究通过分子生物学方法对其进行性别鉴定。利用2550F/2718R对四种天鹅的CHD基因扩增,回收测序获得四种天鹅的CHD基因的部分片段,用Chromos软件、DNAstar软件包的应用程序以及NCBI的Blast进行比较分析,再通过序列设计天鹅属的通用的CHD基因特异性引物。共设计9对引物,其中6对CHD-Z基因引物,3对CHD-W基因引物。将两种基因的引物组合,发现引物Z1/W2组合效果最好。通过已知性别样本的验证、盲测分析和模板浓度梯度的实验,显示当模板浓度为1ng/μL时,引物依然有效,引物的准确率为100%。因此,本研究所建立的方法特异性好、灵敏度和准确率高,可以应用于天鹅的性别鉴定。
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