蜜环菌菌索多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老机理的初步研究

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衰老是生物体普遍存在的一种生理现象,其过程错综复杂,受环境和遗传等多种因素的影响。随着科学技术的发展,衰老过程的分子机制也逐渐被人们所掌握,通过研究药物来延缓衰老已经成为当前热门研究课题之一。自由基氧化损伤理论在众多衰老形成理论中比较有影响力。该学说认为:自由基的积累是衰老形成的主要原因之一。在正常情况下,生物体内的抗氧化酶能够清除机体在有氧代谢过程中所产生的自由基。当生物体处于不利的环境中,自由基就难以完全被清除,逃逸的自由基就会对生物体造成一定的伤害,如破坏细胞膜、引起DNA的损伤等。随着这种损伤的逐渐累积,使得生物体难以修复,从而导致了机体病变及衰老的产生。因此能够加强生物体清除自由基的能力,就能延缓机体衰老的进程。本文以秀丽隐杆线虫为模式生物来研究蜜环菌菌索多糖延缓机体衰老的初步机制,研究内容如下:蜜环菌菌索多糖最佳浓度的筛选:将同期化L4期的秀丽隐杆线虫置于含有蜜环菌菌索多糖的培养基中,正常条件下培养一段时间,然后转到热休克条件下培养并观察其存活。结果发现,蜜环菌菌索多糖两种组分(水相组分AMP-1、盐相组分AMP-2)所有浓度均能提高秀丽隐杆线虫存活率,AMP-1、AMP-2的最佳浓度分别为500μg/mL、1000μg/mL左右,并且AMP-2的作用优于AMP-1。蜜环菌菌索多糖对延长秀丽隐杆线虫的寿命的作用实验:将同期化L4期的秀丽隐杆线虫置于含有蜜环菌菌索多糖的培养基中,正常条件下培养,直到秀丽隐杆线虫死亡,比较秀丽隐杆线虫的产卵量和寿命。结果发现,秀丽隐杆线虫的产卵量没有变化,但蜜环菌菌索多糖处理过的线虫寿命有显著的延长。蜜环菌菌索多糖对秀丽隐杆线虫的防护作用:将突变体线虫CL2070(携带HSP-16.2::GFP报告基因)、CF1553(携带SOD-3::GFP报告基因)置于含有蜜环菌菌索多糖的培养基中,正常条件下培养一段时间,然后转移到37℃培养或者含有胡桃醌的培养基中培养,一段时间后检测HSP-16.2和SOD-3在秀丽隐杆线虫咽部的表达量。结果发现,蜜环菌菌索多糖能够提高压力条件下秀丽隐杆线虫体内HSP-16.2和SOD-3的表达。蜜环菌菌索多糖对秀丽隐杆线虫的修复作用:将氧化损伤的突变体线虫CL2070、CF1553置于含有蜜环菌菌索多糖的培养基中,正常条件下培养一段时间后,检测HSP-16.2和SOD-3在秀丽隐杆线虫咽部的含量。结果发现,蜜环菌菌索多糖能够显著降低氧化损伤秀丽隐杆线虫咽部HSP-16.2和SOD-3的含量。蜜环菌菌索多糖延缓秀丽隐杆线虫衰老机制的进一步研究:正常条件下,将突变体线虫TJ356(携带DAF-16::GFP报告基因)置于含有蜜环菌菌索多糖的培养基培养一段时间,观测DAF-16在细胞质、质核间、细胞核中的分布。结果发现,蜜环菌菌索多糖能够提高DAF-16蛋白在细胞核的分布率。以上结果表明蜜环菌菌索多糖能够延缓秀丽隐杆线虫的衰老,其保护作用机制与蜜环菌菌索多糖的抗氧化作用有着密切的关系。
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