论文部分内容阅读
研究目的:运用益气化瘀解毒方联合化疗治疗Ⅱ-Ⅲ期胃癌术后患者,分析益气化瘀解毒方对Ⅱ-Ⅲ期胃癌术后患者疗效、生活质量及预后的影响;探讨益气化瘀解毒方(YHJD)体内作用于人胃癌细胞MGC-803上皮间质转化和凋亡的影响,体外对裸鼠皮下种植瘤的影响,进一步探讨其抑制胃癌术后复发转移的可能机制。研究方法:1.收集我院87例符合标准的胃癌患者,对照组(单纯化疗组)42例,治疗组(YHJD+化疗)45例,比较两组中医证候疗效、生活质量评分、肿瘤标志物、总生存期及无病生存期的变化。2.通过MTT实验、粘附实验、划痕实验、Transwell小室实验及Western Blot法检测YHJD对人胃癌细胞MGC-803粘附、迁移、侵袭能力及EMT相关蛋白的影响。3.通过流式细胞术、细胞周期实验、Western Blot法检测YHJD对人胃癌细胞MGC-803增殖、凋亡、周期及凋亡相关蛋白的影响。4.采用人胃癌细胞MGC-803建立裸鼠皮下种植瘤模型,观察给药期间裸鼠日常活动、精神状态及肿瘤生长变化,计算瘤体体积、瘤重抑制率,采用Western Blot法、免疫组织化学方法检测移植瘤组织中EMT相关蛋白的变化,Elisa法检测裸鼠血清中TGF-β、IL-6、IL-8、IL-10水平的变化情况。研究结果:1.治疗2个周期后,治疗组在乏力、胃痛、泛酸及呕吐四个症状上有显著改善,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组能明显改善患者总体健康状况和情绪功能,与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05);两组相比,治疗组总生存期明显延长,差异有统计学意义(P<0.05)。2.MTT实验、粘附实验、划痕实验及Transwell实验显示,YHJD可抑制人胃癌细胞MGC-803的增殖、粘附、迁移及侵袭能力;Western Blot实验结果显示,YHJD作用于MGC-803 细胞后,E-cad 表达上升,N-cad、Vimentin、TGF-β、Snail 的表达下降。3.YHJD能促进人胃癌细胞MGC-803凋亡,阻滞细胞于G0/G1期;Western Blot实验结果显示,益气化瘀解毒方作用于MGC-803细胞后,Bax、Cleaved Caspase-3、PTEN表达上升,Bcl-2、PI3K、AKT、PDK1的表达下降。4.YHJD能有效改善裸鼠生存状态,YHJD组裸鼠种植瘤体积及重量明显小于空白对照组(P<0.01),Western Blot及免疫组化结果显示,与空白对照组相比,YHJD组E-cadherin表达上调,N-cadherin、Vinmentin、TGF-β、TGF-βR I、p-Smad2、p-smad3、Twist、Snail、Slug的表达下调。YHJD能降低裸鼠血清TGF-β、IL-6及IL-8的水平。研究结论:1.益气化瘀解毒方能改善胃癌术后患者生活质量,延长生存期。2.益气化瘀解毒方能明显抑制人胃癌细胞MGC-803上皮间质转化,诱导胃癌细胞凋亡,抑制裸鼠种植瘤的生长,抑制裸鼠免疫系统功能。3.益气化瘀解毒方能通过TGF-β/Smad通路抑制人胃癌细胞MGC-803上皮间质转化。4.益气化瘀解毒方能通过PI3K/AKT通路促进人胃癌细胞MGC-803细胞凋亡。