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目的:麻痹性贝类毒素(paralytic shellfish poisoning,PSP)因人食用了含有该毒素的贝类会引起人体产生外周神经麻痹而得名。其特点是广泛分布在世界的各个海域、毒性作用强、对人类致死率高等。PSP是一种钠离子通道阻断剂,对动物的心血管、神经系统有高度的特异性。到目前为止,对此类毒素并没有特效的解毒剂。国内外对PSP的检测建立了多种方法,但这些检测方法优缺点明显,我国目前采用的是国外进口的试剂盒检测,其检测成本较高不利于普及。所以,建立一种简便、灵敏、成本低适合普及的PSP检测方法是非常必要的。方法:本研究以小鼠神经母细胞瘤N2a为受试对象,基于细胞毒性建立PSP酶联免疫检测方法,即细胞检测法。首先广泛搜集近15年来报道的全国发生麻痹性贝类毒素食物中毒事件,进行数据的整理和分析,对麻痹性贝类毒素食物中毒的流行病学分布进行探讨。然后使用蛋白质组学技术筛选出石房蛤毒素(STX)暴露N2a细胞中的差异蛋白,利用Western blot和相应的ELISA方法对差异蛋白进行进一步验证。利用差异蛋白建立检测PSP的细胞检测法,并对此方法分别从灵敏度、特异性和重复性方面进行评价。结果:1、按照剔除标准和步骤进入统计分析的文献共21篇,共报道麻痹性贝类毒素食物中毒事件131起,889例,其中有69人死亡,病死率为7.76%。其中沿海地区共报道130起;第一季度报道3起,第二季度报道67起,第三季度报道59起,第四季度报道2起;食用织纹螺导致麻痹性贝类毒素中毒事件共124起,732例病人。2、与未暴露N2a细胞总蛋白相比,STX暴露N2a细胞总蛋白中共有13个差异蛋白点,经质谱鉴定后,这13个差异蛋白点为9个蛋白;进一步验证发现与未暴露的N2a细胞蛋白相比,小鼠14-3-3蛋白及小鼠α烯醇化酶在STX暴露N2a细胞蛋白中表达上调,小鼠丝切蛋白2在N2a细胞中表达下调。3、采用α烯醇化酶ELISA试剂盒对贝类样品进行检测,其检测结果与ELISA法检测结果相关性良好,R2=0.8106。结论:1、麻痹性贝类毒素食物中毒事件的发生率沿海地区明显高于内陆地区;时间主要发生在第二、三季度;造成麻痹性贝类毒素食物中毒的主要食物是织纹螺。2、STX暴露N2a细胞可以使细胞中小鼠14-3-3蛋白和小鼠α烯醇化酶的表达上调,小鼠丝切蛋白2的表达下调。3、小鼠α烯醇化酶含量与STX浓度在1-10nmol/L范围内具有线性关系。在此基础上建立的PSP细胞检测法具有良好的特异性及重复性,检测限可达到1nmol/L,相当于0.299μg/100g。