【摘 要】
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本论文有两个部分:研究光系统II(PSII)蛋白质变性以及膜脂重组的保护和复性,探讨叶绿体与植物细胞凋亡的关系。第一部分:论文采用圆二色(CD)光谱,吸收光谱、荧光光谱、差式扫描量热法
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本论文有两个部分:研究光系统II(PSII)蛋白质变性以及膜脂重组的保护和复性,探讨叶绿体与植物细胞凋亡的关系。第一部分:论文采用圆二色(CD)光谱,吸收光谱、荧光光谱、差式扫描量热法、氧电极以及可变荧光等手段研究了在不同胁迫条件下,PSII膜复合物的蛋白结构、热稳定性和功能。主要结果是:(1)在热处理过程中,PSII膜复合物中与放氧活性密切相关的锰簇对温度非常敏感。同时,PSII膜复合物膜蛋白二级结构的热稳定性要高于其叶绿素分子之间激子相互作用的热稳定性;(2)SDS(sodium dodecyl sulfate)主要扰动PSII的可溶性外周蛋白,而OGP(n-octyl β-D-glucopyranoside)主要扰动PSII的整合膜蛋白。并且在PSII外周蛋白受扰动的情况下,PSII整体的热稳定性会明显降低,而整合蛋白扰动后对PSII整体热稳定性没有明显影响。(3)在热处理过程中,PSII膜复合物的异常CD信号可能与捕光色素复合物(LHCII)的聚集状态有关,并且LHCII的聚集状态可能也是影响的Fo’一个重要因素。(4)在热处理过程中,磷脂酰胆碱(PC)对PSII膜复合物有保护作用,并且PC的脂酰基侧链的不饱和程度对PC的热保护能力也有一定的影响(5)PC重组虽然不能恢复蛋白质二级结构,但可以优化PSII膜复合物的空间结构,使活性得到部分恢复。第二部分:从烟草悬浮细胞中提取细胞质和细胞核,组成非细胞体系。我们发现菠菜类囊体膜上的重要蛋白复合物细胞色素f可以诱导细胞核发生凋亡。我们推测细胞色素f是一个重要的植物细胞凋亡因子,并且提出了它在生理条件下诱导植物细胞凋亡的可能途径。
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