益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏Treg细胞中foxp3mRNA表达及蜕膜组织STAT5mRNA等表达的实验研究

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目的观察益气补肾中药对自然流产模型小鼠脾脏Treg细胞、蜕膜组织中foxp3mRNA表达的影响及对蜕膜组织中STAT5mRNA、NF-KBmRNA表达的影响。方法将雌性CBA/J与雄性DBA/2或BALB/c小鼠以2:1合笼交配,造自然流产模型和正常妊娠模型。将CBA/J孕鼠分为6组:阴性对照组(NS组)、阳性对照组(CSA组)、中药高剂量组(48g/kg)、中药中剂量组(24g/kg)、中药低剂量组(12g/kg)、正常模型组。将孕鼠于妊娠第9天处死,取新鲜脾脏用于提取Treg细胞;将孕鼠于妊娠第9天或第14天处死,取蜕膜组织-80℃冻存。磁珠分选的方法分离和纯化脾脏Treg细胞,采用流式细胞术鉴定分选前后Treg细胞的纯度,运用RT-PCR分析Treg细胞中foxp3mRNA的表达情况。运用RT-PCR分析蜕膜组织中foxp3mRNA、STAT5mRNA、NF-κBmRNA的表达情况。结果各种干预对孕鼠脾脏Treg细胞中foxp3mRNA的表达:孕9天时,与阴性对照组相比,中药高剂量组Treg细胞中foxp3mRNA的表达增高,差异有统计学意义(P<0.05)。从数值看,各实验组组间有明显趋势,但无统计学差异(P>0.05);各种干预对孕鼠母胎界面组织中foxp3mRNA、STAT5mRNA,NF-κBmRNA的表达情况:RT-PCR测定法经益气补肾中药干预后的孕鼠母胎界面组织中foxp3mRNA、STAT5mRNA,NF-KBmRNA的表达,与阴性对照组比较,中药高、中剂量组foxp3mRNA、STAT5mRNA表达上调(P<0.05),NF-KBmRNA表达下调(P<0.05)。结论 益气补肾实验方可能通过上调自然流产模型小鼠脾脏Treg细胞中foxp3mRNA及蜕膜组织中foxp3mRNA、STAT5mRNA的表达,使妊娠时所需的免疫耐受状态得以维持;同时,益气补肾中药可能通过下调蜕膜组织中NF-KBmRNA的表达,使母胎界面组织中的转录因子表达有利于妊娠的方向发展。
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