人类乳头瘤病毒HPV58亚型L1重组蛋白的原核表达与鉴定

来源 :郑州大学 | 被引量 : 0次 | 上传用户:qq1256280577
下载到本地 , 更方便阅读
声明 : 本文档内容版权归属内容提供方 , 如果您对本文有版权争议 , 可与客服联系进行内容授权或下架
论文部分内容阅读
宫颈癌是常见的妇科恶性肿瘤之一,全球每年约有50万新增病例,发病率在女性恶性肿瘤中居第二位,仅次于乳腺癌。人类乳头瘤病毒HPV(Human Pa-pillomavirus,HPV)属乳头瘤病毒科乳头瘤病毒属,为无包膜DNA病毒,主要引起人类皮肤粘膜的增生性病变。大量分子流行病学和分子生物学研究已经证明,高危型人类乳头瘤病毒诱发宫颈癌,HPV58型在我国宫颈癌妇女中是继HPV16和18之后的第三重要型别,由于HPV具有严格的种属特异性且其增殖严格依赖宿主细胞的分化状态,使得其难以在体外培养,使得传统的灭活及减毒疫苗难以进展,所以研究的重点走向了基因工程疫苗,HPV L1蛋白形成的病毒杨颗粒VLP(virus-like particle)是HPV疫苗的主要形式,在HPV VLP疫苗的研制中,如何以简便高效的制备结构完整、免疫原性强的VLP是所有问题的关键。本研究利用重组表达质粒pGex-6p-1-HPV58-L1转入大肠杆菌E.coli BL21表达HPV58L1蛋白,通过对诱导剂IPTG的浓度、诱导时间以及诱导温度等条件的优化,筛选出最佳条件;由于HPV58L1蛋白的空间结构复杂性等因素,使表达的目的蛋白易形成包涵体,我们通过包涵体复性的办法,使目的蛋白的生物活性得以恢复,同时对目的蛋白的可溶性表达进行了探索,转入伴侣分子,同时通过不同温度的诱导,得到的最佳条件是15℃低温诱导表达的重组蛋白可溶性最好,并进行过柱纯化目的蛋白,western blotting鉴定,结果显示表达的HPV58L1蛋白能HPV16亚型的单克隆抗体发生特异性反应,进行HPV58VLP的生物活性分析,为HPV新型疫苗的研制奠定一定得基础。
其他文献
目的:应用能量多普勒超声(Power Doppler Imaging,PDI)和脉冲多普勒(Pulsed wave Doppler,PW)对周围型肺癌的血流进行检测,旨在通过肿瘤血管显像及其血流动力学特点,反映肿瘤
对于一年生草本花卉的生长,根的数量及其发育程度关系到幼苗移栽后的生长。我们通过大田对照试验,探索出一年生草本花卉用营养球方式过渡移栽技术,可以增加根的数量和改善根
本文对优化施工组织设计降低工程造价进行了全方位的阐述,希望本文可以在一定程度上为相关的专业学者提供参考与借鉴。
维生素A是机体所需的重要营养素之一.当牲畜日粮中维生素A不能满足机体需要而导致缺乏时,就会对骨骼发育、胚胎发育、繁殖机能、消化机能、呼吸机能、铁的动员和利用产生影响
刘震云的《一句顶一万句》的叙事语言极富特色,人与人之间的说话沟通成为小说的主要内容所在。以人与人之间说得来与说不来两种不同表现形态展开形象刻画与乡村叙事。
常压页岩气是中国页岩气勘探开发的主要类型之一,资源潜力大,发展前景广阔。近年来,中国石化华东油气分公司持续在渝东南盆缘构造复杂带南川—武隆地区开展常压页岩气勘探开
<正>中美贸易战愈演愈烈牵动着亿万国人的心,在此大环境下,我们如何应对?为此,本刊编辑部邀请把酒临风、夜雨观澜、金玉其中三位专家做客"深度"栏目,纵横捭阖,直抒胸臆。刀光
MES在工厂综合自动化系统中起着中间层的作用——在MRP Ⅱ、ERP系统产生的长期计划的指导下,MES根据底层控制系统采集的与生产有关的实时数据,对短期生产作业的计划调度、监
随着中国制造2025计划的提出,制造业迎来了发展的新方向——向智能制造方向发展,切削参数的智能优化选择是智能制造技术的重要环节。合理的切削参数有助于提高工件的加工效率
<正>该证书左右长约38厘米,上下宽约29厘米,采用纸质材料印制而成。底色粉红,以彩凤、牡丹、菊花等图案围合成边框。在证书上部中央,采用国旗颜色的五个圆圈内印有红囍字。在