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冠心病严重威胁人类的健康，在全球每年有720万人死于冠心病。在急性心肌梗死之后迅速而确切的心肌再供血是减少心肌梗死及改善患者预后的最有效的治疗策略。近年来，随着溶栓疗法、经皮腔内冠状动脉成形术（PTCA）、冠状动脉旁路移植术（CABG），使心肌缺血后重新得到血液再灌注。但有时缺血后再灌注，不仅不能使心脏功能恢复，反而出现心肌的结构、功能障碍，甚至梗死，形成进一步损伤，既心肌缺血再灌注损伤(I/R)。而怎么减少心肌缺血再灌注损伤为本研究的重点。本研究拟通过建立大鼠的心肌缺血再灌注损伤的模型；并利用H9c2心肌细胞模拟心肌缺血再灌注损伤，分析TRPM4通道与心肌缺血再灌注的关系。方法和结果如下：方法首先利用免疫组织化学方法确定大鼠心肌组织中TRPM4通道蛋白的表达。并建立大鼠的心肌缺血再灌注损伤（I/R）模型，在I/R前给予TRPM4阻断剂9-Phe-nanthrol（9-Phe），分析9-Phe对I/R的影响。接下来利用H9c2心肌细胞研究9-Phe的心肌保护作用机制。为模拟细胞的心肌缺血再灌注损伤，将H9c2细胞暴露在H2O2中或给予缺氧/复氧（hypoxia/reoxygenation,H/R）刺激，研究9-Phe对细胞保护作用的效果。并通过siRNA下调TRPM4的表达水平后，研究该蛋白对心肌缺血再灌注损伤的影响。结果在大鼠实验中TRPM4通道阻断剂9-Phe对心肌缺血再灌注损伤有心肌保护作用，能明显减少心肌梗死。9-Phe组明显小于对照组(分别为9.2±1.1%，37.5±7.6%; p<0.01)。在细胞实验利用MTT方法对H9c2心肌细胞的成活率进行评测。9-Phe处理后将细胞暴露于浓度为200μM H2O2中4小时，与H2O2对照组或DMSO＋H2O2对照组相比有明显的细胞保护作用（吸光度分别为0.34±0.01，0.21±0.01及0.19±0.02）。同样9-Phe对经历H/R的H9c2亦有保护作用。9-Phe＋H/R，H/R，DMSO＋H/R的normalized吸光度分别为1.08±0.05，0.66±0.10和0.60±0.04。接下来运用转染的方法将TRPM4-siRNA转染入H9c2细胞中，通过real timePCR及Western blot的方法证明了TRPM4-siRNA可下调约80%的TRPM4的表达。TRPM4Knockdown的H9c2细胞对H2O2的耐受性明显增强，而9-Phe对其无明显作用。说明9-Phe对H9c2的细胞保护作用是通过抑制TRPM4通道来实现的。结论1.TRPM4通道阻断剂9-Phe在大鼠心肌缺血再灌注损伤中减少心肌梗死。2.9-Phe对H2O2或H/R所致的H9c2细胞损害有细胞保护作用。3.TRPM4Knockdown对H2O2或H/R所致的H9c2细胞损害有细胞保护作用。总之9-Phe是通过抑制TRPM4通道对心肌缺血再灌注有心肌保护作用。