胆管癌一种是起源于胆管上皮细胞的恶性肿瘤,恶性程度高,预后较差,目前唯一能够治愈胆管癌的方法是根治性切除手术。由于其起病隐匿、患者早期发病时无明显症状、临床症状不典型等原因,导致患者在确诊时多发展为晚期,手术已无法根治。因此,找到一种药效好且毒副作用小的天然抗癌药物对于患者的治疗具有重要意义。TBB是从南美蟛蜞菊中提取出来的天然倍半萜内酯化合物。蟛蜞菊具有多种药用功效,近年来其在抗肿瘤方面的作用被不断挖掘,但对胆管癌的抗癌作用及机制研究尚无明确报道。本研究选用人胆管癌细胞作为研究对象,分别从体内水平和体外水平探究蟛蜞菊提取物TBB抗胆管癌的作用及机理。通过MTS实验和EdU实验我们发现TBB具有抑制胆管癌细胞生长增殖的作用,且抑制效果随TBB作用浓度和作用时间的升高而增加;细胞划痕及细胞集落形成实验发现TBB可以抑制胆管癌的迁移和克隆的形成。AO/EB染色实验及Hoechst 33258染色实验发现TBB具有促进胆管癌细胞凋亡的效果,这一结果在流式检测中也得到验证:随着TBB剂量的增加,胆管癌细胞的凋亡率逐渐上升,细胞周期也被阻滞与G2/M期。Western Blot实验证实了 G2/M期相关蛋白CyclinB1的表达随TBB作用浓度的升高而下降,同时p21表达量增加,说明TBB通过调节胆管癌细胞的周期相关蛋白CyclinB1和p21来影响细胞周期的正常进行,使胆管癌细胞的增殖分裂受到抑制。此外,药物处理后细胞的Bcl-2/Bax蛋白表达比例显著降低,Caspase-3和PARP-1蛋白产生剪切片段,以上结果说明TBB诱导胆管癌细胞凋亡可能与内源性线粒体凋亡途径有关。动物水平的研究通过构建人胆管癌细胞QBC939裸鼠移植瘤模型进行。实验结果提示TBB在体内水平也能有效抑制胆管癌细胞的生长,且TBB对裸鼠无明显副作用,实验组的五脏病理切片与对照组无显著差异,表明TBB在有效抑制胆管癌细胞增殖的同时不会产生明显毒副作用。综上所述,蟛蜞菊提取物TBB在体内和体外水平都具有抑制胆管癌细胞增殖和促进胆管癌细胞凋亡的作用,具有开发为胆管癌治疗药物的潜能。