葡聚糖—寡胺阳离子化合物的制备及其基因转染效率的研究

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本研究的目的是制备具有转基因功能的葡聚糖-寡胺阳离子化合物基因载体,其意义在于探索非病毒基因载体,解决基因治疗的载体问题。目前用于基因治疗的病毒性载体虽然具有较高的转染效率,但其体内毒性、免疫原性等诸多缺陷限制了其应用,而安全无毒、生物相容性好的非病毒基因载体则有望弥补病毒性载体的不足并成为基因治疗的新一代载体。 以目前非病毒基因载体中前景较好的葡聚糖-寡胺阳离子化合物为研究对象,从多种葡聚糖-寡胺阳离子化合物中优选出转染能力最强的载体,并对其进行进一步的研究,力图找出影响该化合物基因转染能力的因素和内在规律。本研究的主要研究方法、内容、结论包括以下几个方面。 首先,将分子量不同的葡聚糖10(Dextran10)、葡聚糖40(Dextran40)、葡聚糖70(Dextran70)分别氧化成三种氧化度不同的氧化葡聚糖,共制备9个品种的氧化葡聚糖,并以盐酸羟胺法测定了各种氧化葡聚糖分子上的醛基含量。在预试验的基础上以载体的基因转染效率为考察指标,通过正交试验考察影响载体转染效率的因素并优选载体的制备条件,结果氧化葡聚糖的种类、氧化葡聚糖的氧化度(醛基含量)、反应物寡胺与醛基的配比、寡胺的种类四种因素对转染效率均有显著的影响(p值均小于0.05),载体的最佳制备条件为:高氧化
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