基底刚度对海马神经网络钙信号以及突触传递的影响

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研究目的:细胞外基质和细胞支撑基底的力学特性能够调控神经元的生长、分化、延伸、分支。基底刚度是海马神经元响应以及形成培养神经网络中突触传递的重要微环境因素。本研究旨在观察基底刚度对培养的海马神经网络钙信号及突触传递的影响。研究方法:选取新生24小时内小鼠乳鼠,分离两侧海马组织,采用酶消化法得到单细胞悬液,培养至相似表面但弹性模量不同的PDMS软硬基底上;取培养数天的海马神经元,进行免疫荧光、钙离子成像检测,采用膜片钳技术,观察两组细胞电压门控钙通道电流和自发性突触后电流。研究结果:1)两种PDMS基底表面表现出相似的表面粗糙度和拓扑结构,但基底弹性模量却相差十倍。2)海马神经元在PDMS基底上生长良好,能形成神经网络;软硬基底上的海马神经元生长无显著差异;同时,兴奋性和抑制性神经元的生长比例亦无显著性差异。3)硬基底上海马神经网络自发性同步钙振荡的幅值和频率都显著高于软基底。4)硬基底上海马神经元电压门控钙通道电流幅值和密度均显著大于软基底。5)硬基底上神经网络自发兴奋性突触后电流的频率和幅值显著高于软基底;但自发抑制性突触后电流无显著变化。研究结论:硬基底能够引起海马神经元钙活动和电压门控钙通道功能上调、增强神经网络兴奋性神经元传递,基底刚度是调控海马神经网络钙信号和突触传递的重要生物物理因素。
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