双歧杆菌脂磷壁酸体外诱导胃癌细胞BGC823凋亡的实验研究

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目的:探讨双歧杆菌脂磷壁酸(LTA)体外诱导胃癌细胞凋亡的作用及机制。方法:采用MTT试验、电镜观察及流式细胞仪检测双歧杆菌LTA对体外培养的胃癌细胞BGC823的抑制作用、超微结构及细胞周期的变化,并用免疫组化技术检测LTA对凋亡相关蛋白c-fos、p53、bcl-2、c-myc表达的影响。结果: MTT试验结果显示20μg~80μg/ml的LTA对体外培养的BGC823细胞具有明显的生长抑制作用,且LTA的浓度越大、作用时间越长,其抑制作用越强,具有浓度和时间依赖性。20μg/ml LTA作用72h后,对BGC823细胞的生长抑制率达到53%,80μg/ml LTA作用72h后,对BGC823细胞的生长抑制率达到79%。电镜观察发现未经LTA作用的对照组细胞核大,常染色质丰富,细胞浆中线粒体、内质网、高尔基体等细胞器少,微绒毛较丰富。经50μg/ml LTA作用72h后细胞微绒毛消失,细胞质电子密度加深,出现大量脱落的凋亡小体。流式细胞仪检测发现,50μg/ml LTA作用48h后能将细胞阻滞于G0/G1期, 在细胞周期G1峰的左侧出现了凋亡峰。免疫组化结果显示,LTA <WP=8>能上调c-fos、p53蛋白的表达、并使bcl-2、c-myc蛋白的表达下降。结论:双歧杆菌LTA能诱导胃癌细胞株BGC823凋亡,细胞被阻滞在G1期,同时上调BGC823细胞中c-fos、p53蛋白的表达,使bcl-2、c-myc的表达下降,这可能是双歧杆菌LTA诱导肿瘤细胞凋亡的机制之一。
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