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目的:建立新生大鼠缺氧缺血性脑损伤(hypoxicischemicbraindamage,HIBD)模型,研究选择性A2AR拮抗剂SCH58261对短期神经行为学、ICAM-1的表达及细胞凋亡(细胞凋亡指数)的影响,探讨其对新生大鼠HIBD是否存在神经保护作用及合适药物剂量。方法:1.实验分组及模型制作:将40只7日龄新生SD大鼠随机分为5组:Sham组、HIBD组、SCH582610.01mg/kg组、SCH582610.2mg/kg组、SCH582612mg/kg组,每组各8只。参照Rice法建立HIBD模型,Sham组仅分离左颈总动脉,不进行缺氧缺血;HIBD组结扎左颈总动脉,置于8%氧气中缺氧2小时(h);不同剂量给药组于HIBD造模后即刻腹腔注射SCH582610.01mg/kg、0.2mg/kg、2mg/kg(均溶于0.1mlDMSO中),HIBD组给以0.1ml的DMSO。2.观察指标:各组新生大鼠于HIBD后24h进行神经行为学评定,然后断头处死分别进行HE染色观察脑组织病理改变、免疫组织化学法检测ICAM-1表达、TUNEL法观察细胞凋亡。结果:1.短期神经行为学评定:与Sham组比较,其余4组完成三项神经反射成绩均较差,差异有统计学意义(P<0.05),提示缺氧缺血后短期神经功能受损。与HIBD组相比,三个SCH58261给药组翻正反射、悬崖逃避反射及趋地反射所需时间均缩短(P<0.05);随着剂量的减低,三项短期感觉运动反射所需时间减少(P<0.05),其中0.01mg/kg组作用最明显。2.脑组织病理形态学改变:Sham组细胞结构完整,形态正常,边界清楚,核仁清晰。HIBD组脑组织结构紊乱,细胞数明显减少,细胞肿胀、变性,神经元坏死明显。SCH582612mg/kg组可见较多核深染、固缩,与HIBD组相比差异不大;0.2mg/kg组排列紊乱,可见部分形态正常的细胞,细胞数多于2mg/kg组;0.01mg/kg组神经细胞存活数增多,细胞排列尚规则,仅见少许细胞核固缩、碎裂,较0.2mg/kg组及2mg/kg组脑组织损伤减轻。3.免疫组化观察ICAM-1的表达:ICAM-1阳性染色呈棕黄色细颗粒沉积,阳性着色于神经元胞浆和胞核内均可见。ICAM-1在Sham组低水平表达,其余4组脑组织中ICAM-1的表达均较Sham组增加,差异均有统计学意义(P<0.05)。与HIBD组相比,三个SCH58261给药组ICAM-1的表达均降低(P<0.05);随着剂量的减低,ICAM-1的表达逐渐下降(P<0.05),其中0.01mg/kg组表达最低。4.TUNEL技术检测细胞凋亡:Sham组仅见极少量的TUNEL阳性细胞,其他4组凋亡细胞相对增加,AI较Sham组升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与HIBD组相比,三个SCH58261给药组AI降低(P<0.05);随着剂量的减低,AI逐渐减少(P<0.05),其中0.01mg/kg组AI最少。5.AI与ICAM-1表达之间的相关性分析:所有模型组(包括HIBD组及三个给药组)脑组织中AI与ICAM-1均呈显著正相关(r1=0.825,P1<0.05;r2=0.937,P2<0.01;r3=0.868,P3<0.01;r4=0.830,P4<0.05),提示随着ICAM-1表达的增加,细胞凋亡增加。6.短期神经行为学评价与ICAM-1表达的相关性分析:所有模型组(包括HIBD组及三个给药组)翻正反射、悬崖逃避反射、趋地反射与ICAM-1的表达分别呈正相关(r1=0.888,P1<0.01;r2=0.734,P2<0.05;r3=0.863,P3<0.01;r4=0.902,P4<0.01)、(r1=0.766,P1<0.05;r2=0.897,P2<0.01;r3=0.831,P3<0.05;r4=0.769,P4<0.05)、(r1=0.878,P1<0.01;r2=0.817,P2<0.05;r3=0.762,P3<0.05;r4=0.804,P4<0.05),这均提示随着ICAM-1表达的增加,短期感觉运动反射完成时间增加。结论:1.缺氧缺血后新生大鼠出现明显的脑损伤,表现在:脑组织结构紊乱,细胞形态改变如细胞肿胀、变性、坏死,短期神经功能受损,证实新生大鼠HIBD模型建立成功。2.缺氧缺血后新生大鼠脑组织中ICAM-1表达明显增加,且ICAM-1表达与AI、短期感觉运动反射均呈正相关,说明ICAM-1参与了新生鼠HIBD的发病过程。3.缺氧缺血后新生大鼠应用选择性A2AR拮抗剂SCH58261干预后,神经细胞变性、坏死程度减轻,短期神经行为学改善,细胞凋亡减少,提示SCH58261对HIBD存在脑保护作用,其作用可能是通过下调ICAM-1的表达实现。4.新生大鼠HIBD后給予三个不同剂量的SCH58261均能减轻脑损伤,其中低剂量组(0.01mg/kg)作用最明显。