目的：应用自体软骨细胞膜片移植技术（Autologous chondrocytes sheettransplantation，ACST）治疗膝关节软骨缺损，通过对病人进行术后最长18个月的早期随访，评价ACST技术的有效性和安全性。方法：从2012年6月至2013年10月，对总共5例患者实施ACST手术。患者平均年龄26.6岁（14～39岁），平均缺损面积（1.0～4.0cm2）。关节镜下检查确诊膝关节软骨缺损，并取关节非负重区软骨进行体外消化分离培养，制成软骨细胞膜片。根据关节软骨缺损形状和范围裁剪软骨细胞膜片，覆盖于缺损处并使用重组人纤维蛋白粘合剂固定，配合术后特定康复计划。分别于术前、术后1月、术后3月、术后6月、术后12月、术后18月进行Lysholm评分和VAS评分，评价膝关节术后功能恢复情况。核磁共振检查术前常规进行，术后6月、12月、18月再次检查，观察移植物修复情况，并进行MOCART评分。结果：术后Lysholm评分、VAS评分较术前明显改善。术后6月显示：软骨缺损处基本填充软骨组织修复信号与周围正常组织接近，骨髓水肿信号减退；术后12月软骨修复平整，与周围正常组织融合良好，骨髓水肿信号消失。术后18月显示移植软骨与周围正常组织完全融合，关节面平整，无关节积液。5例患者均未发生并发症及与手术相关不良事件。结论：ACST技术是修复膝关节软骨缺损安全、有效的治疗手段，为避免因软骨缺损导致的关节退变、关节功能障碍等严重并发症提供了一种新的治疗方案。