一、临床病例观察目的：研究非肥胖糖尿病患者骨密度水平与二甲双胍治疗的关系。方法：选取162名于2008年6月至2014年02月就诊福建医科大学附属第一院内分泌科的2型糖尿病患者及健康体检者，2型糖尿病的诊断标准根据WHO诊断标准。2型糖尿病患者为BMI均小于25kg/m2，单独使用二甲双胍（0.75-1.5g/日，平均使用时间2.96±0.58年）或单纯生活方式干预(干预时间不少于6个月，平均2.33±3.38年)，女性病例均已绝经，男性病例年龄均大于50岁。根据性别及用药分为：男性糖尿病单纯生活方式治疗组（n=32，平均年龄57.50±9.76）、男性糖尿病二甲双胍治疗组（n=32，平均年龄57.42±8.67），女性糖尿病单纯生活方式治疗组（n=22，平均年龄63.45±10.03）、女性糖尿病二甲双胍治疗组（n=22，平均年龄64.64±11.65）。并分别设立对应的健康对照组（男性n=32，平均年龄57.56±8.82；女性n=22，平均年龄64.64±11.91）。双能X线骨密度仪（DXEA）测量上肢、大腿、双股骨、脊柱、躯干、全身等部位骨密度。空腹8小时后抽血测定总胆固醇（TCH）、甘油三酯（Tg）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、血糖及糖化血红蛋白（HbA1c）。组间比较采用方差分析，率的比较采用χ2检验或Fisher精确概率法，二甲双胍与骨密度相关性采用偏相关分析。结果：1.与同性别健康对照组相比，两组糖尿病组血糖较高（均P<0.05）。与同性别单纯生活方式治疗组相比，二甲双胍治疗组血糖较低（均P<0.05）；男性二甲双胍治疗组HbA1c较低（P<0.05），女性则无差别。同性别两组糖尿病组糖尿病病程、糖尿病合并症情况无明显差别。其余基线资料如年龄、BMI、骨折史、收缩压、舒张压、总胆固醇（TCH）、甘油三酯（Tg）、低密度脂蛋白胆固醇（LDL-C）、绝经年限（仅限女性）等，同性别三组间对比无差别。2.与健康对照组对比，男性单纯生活方式治疗组双股骨密度较低，差别具有统计学意义（P<0.05），男性二甲双胍干预组及女性两组糖尿病组双股骨骨密度无差别。其余各部位骨密度及脊柱、双股骨骨量异常构成比，男性或女性三组间对比均无差别。3.校正年龄、糖尿病病程、BMI、血糖、HbA1c、绝经年限（女性）后，与同性别健康对照组相比，单纯生活方式治疗组或二甲双胍治疗组骨密度均无差别。与同性别单纯生活方式治疗组相比，二甲双胍治疗组各部位骨密度亦无差别。4.校正年龄、糖尿病病程、BMI、血糖、HbA1c、绝经年限(女性)后，不同性别非肥胖糖尿病患者各部位骨密度与是否使用二甲双胍无明显相关性。结论：非肥胖糖尿病病人中，二甲双胍治疗似不改变非肥胖糖尿病患者的骨密度水平。二、动物实验目的：探讨二甲双胍对STZ诱导的糖尿病大鼠骨密度的作用及TLR-4/NF-κB表达的变化。方法：45只实验用5-6周龄SD雄性大鼠予以一次性腹腔注射1%链脲佐菌素STZ(50mg/kg)，72h后测空腹血糖≥16.7mmol/L者，确定1型糖尿病模型建立，建模成功率为64.44%。成模后随机分为分为糖尿病组(n=14)、糖尿病二甲双胍干预组（n=15），并设立正常对照组（n=15）。正常对照组大鼠和1型糖尿病大鼠均予以普通饲料喂养。造模成功两周后开始行二甲双胍（900mg/kg/d）干预治疗，干预时间16周。干预16周后处死大鼠，用双能X线骨密度仪（DXEA）检测上肢骨密度、大腿骨密度、躯干骨密度、脊柱骨密度、全身骨密度（BMD)，Western blot检测糖尿病大鼠股骨TLR-4(toll样受体4)、NF-κB(核转录因子kappa B)、BMP-2(骨形态发生蛋白2)的表达情况。组间对比采用方差分析。结果：1.干预前，与正常对照组相比，两组糖尿病大鼠体重均较低，血糖则较高（均P<0.05）；两组糖尿大鼠组间对比无差别。2.干预16周后，正常对照组15只，糖尿病组成模13只，糖尿病二甲双胍干预组成模13只。3.干预16周后，与正常对照组相比，糖尿病组与糖尿病二甲双胍干预组体重、大腿骨密度、躯干骨密度、全身骨密度较低，而血糖较高，差别具有统计学意义（均P<0.05）；糖尿病组上肢骨密度、OCN较正常对照组低，差异具有统计学意义（均P<0.05），而TRAP-5b无差别。糖尿病二甲双胍干预组骨转换指标与正常对照组对比无差别。与糖尿病组相比，糖尿病二甲双胍干预组上肢骨密度较高，差异具有统计学意义（P<0.05）；两组糖尿病大鼠骨转换指标对比均无差别。脊柱骨密度三组间对比无差别。4.干预16周后，与正常对照组相比，两组糖尿病大鼠TLR-4、NF-κB较高，而BMP-2较低（均P<0.05）。与糖尿病组相比，糖尿病二甲双胍干预组TLR-4、NF-κB较低，而BMP-2较高（均P<0.05）。结论：二甲双胍可抑制TLR-4/NF-κB的表达，但对糖尿病大鼠主要部位如大腿、躯干、脊柱及全身骨密度无明显影响。