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基因治疗是通过适当设计的载体,将外源基因导入到细胞中进行表达,用以纠正、取代异常基因或杀死异常细胞来治疗疾病,常用于传统医学难于治愈的人类遗传疾病。与一般性遗传疾病相比,起来相对困难些,但是靶向基因治疗癌症仍然是一个重要的方向,关键是如何癌症具有异常基因多,致病机理复杂的特点,因此治疗设计合理的基因载体。无肠腺病毒(gutless adenovirus)载体是将野生腺病毒基因除反向末端重复序列(ITR)和包装信号(Packaging Signal,ψ)外全部缺失,用填充序列替代。它依靠辅助病毒(help virus)提供病毒蛋白,因此又叫依赖辅助病毒的腺病毒(HD-Ad)载体。它与传统腺病毒载体相比,无肠腺病毒载体具有免疫原性小,可插入外源基因片断大,表达时间持久等优点。本论文构建由人端粒酶逆转录酶(hTERT)启动子及RU486来靶向调控的无肠腺病毒载体.首先用此载体携带报告基因进行体外细胞实验,发现在端粒酶阳性的肿瘤细胞中,在没有RU486条件下报告基因的表达量几乎检测不到,而在给药(RU486)后表达量明显增加,并且与RU486的浓度和诱导时间有明显的关系。然后用携带抗癌基因Trail的载体,通过在菌株BJ5183中重组构建出GL-Ad-trail重组病毒的质粒,依赖辅助病毒在293Cre4细胞中进行包装及扩增。得到GL-Ad-trail重组病毒后进行体外细胞实验,发现此重组病毒经RU486诱导后能特异性的在肿瘤细胞中激活Caspase-3(胱冬肽酶 3)及Caspase-8而导致细胞凋亡,而对正常细胞则没有影响。该结果说明GL-Ad-trail重组病毒能在肿瘤细胞中特异性表达Trail蛋白,并引起由死亡信号途径介导的细胞凋亡。总之本论文所构建的靶向可调控无肠腺病毒载体的靶向性及可调控性都十分良好,并为下一步开展的双基因靶向可调控及双基因双靶向无肠腺病毒载体的设计提供了一个理想的平台。