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该课题从以下几个方面探讨KIR2DL4的生物落实功能及在母胎免疫耐受中可能的作用.第一部分 蜕膜组织KN细胞受体表达分析为了探讨子宫蜕膜组织中NK细胞受体的分布格局及表达水平与母胎免疫耐受之间的关系,我们采用RT-PCR和免疫组织化学法检验了10例早期自然流产患者和40例同期正常早孕要求行人工流产者蜕膜组织的NK细胞受体mRNA的分布格局及KIR2DL4分子的表达特点.第二部分KIR2DL4与HLA-G分子的识别特民性研究为探讨HLA-G独特的Met<'76>、Gln<'79>对KIR2DL4识别特异性的影响,该研究成功构建了表达KIR2DL4胞外区和IgG FC融合蛋白的真核表达载体CD5lnegl-2DL4,并使KIR2DL4-Ig融合蛋白在COS-7细胞中获得功能性表达.第三部分 KIR2DL4cDNA克隆及在NK-92细胞上的表达该研究采用RT-PCR从人蜕膜组织中克隆了KIR2DL4cDNA,并通过构建重组逆转录病毒表达载体pLNCS-2DL4,经PA317细胞包装后筛选高滴度的病毒上清,采用感染的方法使其在微量表达内源性KIR2DL4的NK-92细胞表面获得稳定高表达.第四部分KIR2DL4的表达对NK-92细胞功能的影响该部分实验进一步研究了表达在NK-92细胞上的KIR2DL4分子与HLA-G分子相互作用后对NK细胞功能的影响,以期探讨KIR2DL4分子在母胎免疫耐受中可能的作用.