1骨复活汤对激素性股骨头坏死血液流变学及脂代谢的影响 目的：探讨SANFH的发病机制及骨复活汤对SANFH血液流变学及脂代谢的影响。 方法：将实验动物随机分为四组，每组8只，分别为对照组、模型组、骨复活汤低剂量组(15g.kg-1)及骨复活汤高剂量组(30g.kg-1)。每周两次臀部肌肉注射醋酸泼泥松7.5mg/kg，正常对照组每周两次注射等量生理盐水，骨复活汤组同模型组一样，用药同时每日给予骨复活汤灌胃给药，为了预防感染所有动物每周两次肌注青霉素(5×104单位/只)，共注射6周。每周称体重1次，观察动物皮毛、活动情况。末次给药后心脏取血，测定全血粘度(高切200s-1，低切40s-1)，血浆粘度和红细胞压积。末次给药后耳中央动脉取血分离血清，测定血清总胆固醇和甘油三酯的含量。组织切片进行光镜观察及透射电镜观察。并进行骨复活汤小鼠急性毒性实验。四组家兔血液流变学测定、血脂测定资料用t检验进行统计学处理，四组家兔体重、股骨头空骨陷窝率比较，经SAS统计软件做正态性检验、方差齐性检验、方差分析、Q检验处理，实验数据用均数和标准差(x±S)表示。 结果：一般形态观察：在试验期内，对照组家兔体重逐渐增加，病理模型组家兔体重逐渐下降，消瘦，皮下脂肪显著减少，骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔体重均略有下降，动物状态均明显较病理模型组家兔好，6周后，对照组、骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔与病理模型组家兔体重比较，有显著性差异(P＜0.05)，对照组、骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔体重相互比较，无显著性差异(P＞0.05)。血液流变学检测结果：模型组家兔全血低切粘度、血浆粘度、红细胞压积均较正常对照组家兔升高，有显著性差异(P＜0.01)，骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔全血低切粘度、血浆粘度、红细胞压积均较病理模型组家兔降低，有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。血脂测定结果：模型组家兔血清总胆固醇和甘油三酯水平均较正常对照组家兔升高，有显著性差异(P＜0.01)，骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔血清总胆固醇和甘油三酯均较病理模型组家兔降低，有显著性差异(P＜0.05或P＜0.01)。HE切片及透射电镜观察结果：对照组股骨头软骨下区软骨细胞排列整齐，小血管丰富，骨小梁排列整齐，骨髓内组织紧密，软骨下区骨髓内脂肪细胞均匀分布，骨板内仅见极个别空骨陷窝；病理模型组家兔股骨头大量空骨陷窝，髓腔内脂肪细胞明显增多增大，骨髓内出现灶状出血，透射电镜见骨细胞核膜破裂，核浓缩，染色质溶解，胞浆内可见脂滴，异常肥大的脂肪细胞压迫小静脉，使受压管腔骤然变窄，毛细血管内皮细胞胞浆中出现较大的低电子密度脂滴；骨复活汤(15g.kg-1，30g.kg-1)组家兔股骨头空骨陷窝数均较少、髓腔脂肪细胞均较少较小，骨小梁稀疏、未见断裂。对照组家兔股骨头空骨陷窝率12.87±2.36，模型组家兔股骨头空骨陷窝率21.75±2.92，骨复活汤低剂量组(15g.kg-1)家兔股骨头空骨陷窝率16.62±2.39，骨复活汤高剂量组(30g.kg-1)家兔股骨头空骨陷窝率15.87±1.88，方差分析：F=18.67，P=0.0001，四组间有显著性差异，Q检验：模型组家兔与对照组及骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔股骨头空骨陷窝率比较，有显著性差异(P＜0.05)，骨复活汤低剂量组与高剂量组家兔股骨头空骨陷窝率比较，无显著性差异(P＞0.05)，骨复活汤组(15g.kg-1，30g.kg-1)家兔与对照组家兔股骨头空骨陷窝率比较，有显著性差异(P＜0.05)。骨复活汤小鼠急性毒性试验结果：经预试无法测出LD50，故进行最大给药量实验，给药后动物在7日内动物一般状态良好，毛色光滑、体重增长、饮食及活动未见异常，无一死亡，未发现明显毒性反应。其小鼠灌胃给药最大药量为816g生药/日，相当于成人临床用量的255倍(临床成人70kg，用量228g生药/日)。 结论：大剂量激素引起脂肪代谢紊乱，导致高脂血症、使骨组织脂代谢紊乱，股骨头内骨细胞脂肪变性、坏死；引起血液高粘滞状态，静脉内瘀滞，股骨头骨内压升高，骨组织缺血、坏死。骨复活汤能够改善家兔SANFH的血流变及脂代谢。而且毒性小。 2骨复活汤对激素性股骨头坏死股骨头局部细胞凋亡的影响 目的：探讨SANFH的发病机制及骨复活汤对SANFH股骨头局部细胞凋亡的影响。 结果：空骨陷窝情况：正常对照组兔股骨头骨髓内骨细胞核着色均匀，骨陷窝内骨细胞形态正常，骨髓内骨细胞分布适中；模型组兔股骨头骨髓内骨细胞核不着色，形成大量空骨陷窝；骨复活汤组兔股骨头骨髓内骨细胞变性，核变扁偏于一侧，骨细胞核部分着色，骨细胞分布较对照组少，空骨陷窝少；仙灵骨葆组兔股骨头骨髓内骨细胞变性，核变扁偏于一侧，骨细胞核少部分着色，空骨陷窝少，骨细胞分布较骨复活汤组少。正常对照组家兔空骨陷窝率12.01±2.13，模型组家兔股骨头空骨陷窝率26.03±4.54，骨复活汤组空骨陷窝率16.50±2.56，仙灵骨葆组空骨陷窝率17.51±2.98，方差分析：F=26.95，P=0.0001，四组间有显著性差异，Q检验：模型组家兔与对照组、骨复活汤组(15g.kg-1)及仙灵骨葆组家兔股骨头空骨陷窝率比较，有显著性差异(P＜0.05)，骨复活汤组(15g.kg-1)家兔与仙灵骨葆组家兔股骨头空骨陷窝率比较，无显著性差异(P＞0.05)，骨复活汤组(15g.kg-1)、仙灵骨葆组家兔与对照组家兔股骨头空骨陷窝率比较，有显著性差异(P＜0.05)。细胞凋亡情况：骨细胞凋亡正常对照组的标本上的骨细胞凋亡极少，骨细胞凋亡指数为3.10±0.41；在病理模型组的骨标本上，可见骨细胞核中有棕黄色颗粒的阳性细胞，即凋亡细胞，骨髓组织内出现大量凋亡的骨细胞，其骨细胞凋亡指数为30.41±4.91；骨复活汤组(15g.kg-1)骨细胞凋亡较病理模型组少，骨细胞凋亡指数为21.93±2.27；仙灵骨葆组的标本上，骨细胞凋亡较病理模型组少，骨细胞凋亡指数为23.28±2.47； 结论：家兔SANFH病程中，骨坏死是通过激素诱导骨细胞及成骨细胞的凋亡和坏死共同作用的结果方式进行的；骨复活汤在改善家兔SANFH的骨细胞、成骨细胞凋亡及坏死方面有一定作用。 3骨复活汤对SANFH股骨头局部血管内皮细胞VEGFmRNA表达的影响 目的：探讨骨复活汤对SANFH股骨头局部血管内皮细胞VEGFmRNA表达的影响。 结果：显微镜下观察VEGFmRNA表达分布的情况，股骨头标本在400倍光镜下随机选取10个视野。AEC染色的阳性表达为红色，以血管瘤阳性对照片中血管内皮细胞的胞浆中出现的红色颗粒的染色程度作为VEGFmRNA表达的标准。淡红色为(+)，深红色为(+++)，介于两者之间为(++)，阴性为(一)。正常的股骨头组织的高倍镜下，可以看到在软骨下微小血窦和骨小梁髓腔内的微小血管内皮细胞的胞浆有弱阳性(+)表达；模型组由于微小血管受到破坏，血管内皮细胞的数量减少，微小血管内皮细胞表达较少；骨复活汤组微小血管内皮细胞的VEGFmRNA较高阳性(+++)表达，内皮细胞数量增加，微小血管数量增加；仙灵骨葆组微小血管内皮细胞的VEGFmRNA阳性(++)表达，内皮细胞数量增加，微小血管数量增加。 结论：家兔SANFH病程中，激素对于股骨头局部血管内皮细胞VEGFmRNA表达有抑制作用；骨复活汤药物能够促进股骨头局部血管内皮细胞的活性。 4骨复活汤和髓芯减压术治疗激素性早期股骨头坏死的临床研究 目的：观察骨复活汤和髓芯减压术与仙灵骨葆和髓芯减压术治疗SANFH国际分期法Ⅰ、Ⅱ期的临床疗效比较。 结果：疗效评定标准参照《中国中医骨伤科杂志》所列标准及临床经验制定。治愈：疼痛完全消失，活动后无疼痛，临床检查功能正常，X线片及CT显示骨质复活，骨小梁连续完整，密度均匀。MRI的T1加权像低密度区恢复正常。显效：疼痛完全消失，活动后无疼痛，临床检查功能正常，X线片及CT显示骨质复活，有明显的骨修复，坏死区明显减少，骨小梁排列整齐规则，MRI的T1加权像低密度区明显减小。 结论：SANFH主要系长期使用激素药物，或大量使用，或间断一次量过大使用激素药物所致。SANFH的早期组织学改变为空骨陷窝增多，骨髓腔内脂肪细胞增生、肥大及间质水肿，骨细胞进一步坏死，出现骨小梁和骨髓坏死，并开始部分坏死组织修复；骨髓腔内脂肪细胞增生、肥大及间质水肿是造成股骨头内骨内压升高的主要原因，是引起SANFH的主要因素之一。髓芯减压术治疗早期SANFH的疗效满意。骨复活汤和髓芯减压术优于仙灵骨葆和髓芯减压术治疗成人早期SANFH的疗效；越早期发现治疗效果越好，早期诊断、早期治疗对本病的疗效至关重要。MRI是目前诊断早期股骨头缺血坏死最敏感的方法。