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中性蛋白酶是指其最适作用pH介于6.0~7.5之间的一类蛋白酶,能催化蛋白质肽键水解。由于具有催化反应速度快,无工业污染,催化反应条件适应性宽等独特的性质和优点,被广泛地应用于食品、制药、化妆品、洗涤剂、丝纺、毛皮软化等行业。为了大幅度提高中性蛋白酶发酵单位以降低生产成本,本论文以陆良酶制剂厂的中性蛋白酶生产菌株枯草芽孢杆菌(B.subtilis)为研究对象,克隆并在毕赤酵母中表达了其包括pro-序列在内的中性蛋白酶全长基因以及功能区基因。同时,通过对重组毕赤酵母发酵条件的优化,以及重组中性蛋白酶粗