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目的:①以科学的方法建立可靠的小鼠脾虚证动物模型。 ②用SDS-PAGE技术对小鼠血清蛋白质组进行初步分析。 ③采用双向凝胶电泳(2-DE)技术分析正常对照组(以下统称正常组)、脾虚模型组(以下统称模型组)、参苓白术散低剂量组(以下统称低量组)和参苓白术散高剂量组(以下统称高量组)血清的二维凝胶图谱,对治疗后表达差异明显的蛋白点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)鉴定分析。 方法:①采用利血平单因素造模法建立脾虚证小鼠动物模型,观察各组小鼠一般情况、体重和饮食量的改变,并采用比色分析法及ELISA法分别测定各组小鼠血清D-xylose及Gastrin的含量进行验证。 ②通过SDS-PAGE技术对各组血清进行分离,建立正常组、脾虚模型组、参苓白术散药物组电泳图谱。利用Quantity One图像分析软件对各组图谱进行对比分析,观察其改变。 ③分别收集正常组、模型组、高量组和低量组的血清样本,对样本处理后分别进行双向凝胶电泳,并利用PDQuest8.0图像分析软件对2-DE图谱进行差异性分析。选取差异明显的蛋白点进行基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱鉴定,检索数据库鉴定蛋白质。 结果:①成功建立了可靠的的脾虚证动物模型。 ②对小鼠血清蛋白质组SDS-PAGE图谱进行分析后,三个组分离均得到20个条带,脾虚模型组与正常组相比,脾虚模型组有7个条带表达增强,3个条带表达减弱,参苓白术散药物组均能使脾虚组高表达的7个条带和低表达的3个条带恢复到正常水平或趋于正常水平。 ③经过比较分析四组血清电泳图谱,有明显差异的蛋白点有35个,对其中10个差异点进行质谱鉴定,成功鉴定出6种蛋白,分别为:beta-globin、vitamin D-binding protein、pregnancyzone protein、apolipoprotein A-I、apolipoprotein A-IV和albumin。 结论:①采用利血平单因素建立的脾虚证小鼠动物模型成功可靠。 ② SDS-PAGE电泳是对血清蛋白质组进行初步分析的理想技术。 ③鉴定出的vitamin D-binding protein、beta-globin、apolipoprotein A-I、apolipoprotein A-IV等蛋白质可能在一定程度上反映了脾虚证的病变特征,为脾虚证的进一步研究提供新的思路。