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白花蛇舌草Hedyotis diffusa Willd.)为茜草科耳草属植物,全草入药,产于江苏、安徽、福建、浙江、广西等地,夏、秋二季采收。性寒,味微苦、甘,用于治疗痈肿疮毒、毒蛇咬伤、咽喉肿痛等疾病。主成分为黄酮类、蒽醌类、环烯醚萜类化合物。其药理活性的广泛性已得到现代研究的证实,特别是其所具有的抗肿瘤和调节免疫活性,近年来受到密切关注。为合理开发利用白花蛇舌草药材资源,本文在对其化学成分进行分离鉴定的基础上,首次对白花蛇舌草中总环烯醚萜成分做了提取工艺优选的研究,并对白花蛇舌草药材中6种主要成分做了定量分析研究,以期为进一步明确其有效作用的物质基础及质量控制提供依据。论文主要包括以下几个部分:1.文献综述通过系统的查阅有关白花蛇舌草的国内外文献,对白花蛇舌草的化学成分、质量分析、药理作用、提取工艺及环烯醚萜类成分纯化工艺方面的研究进展进行了综述。2.白花蛇舌草化学成分分离鉴定采用了硅胶、sephadex LH-20、MCI、C18、HPLC制备色谱等分离方法,从白花蛇舌草中分离得到20个化合物,根据波谱数据和理化性质共鉴定17个化合物:(E)-6-O-对香豆酰鸡屎藤次苷甲酯(E)-6-O-p-coumaroyl scandoside methyl ester(化合物1)、(Z)-6-O-对甲氧基桂皮酰鸡屎藤次苷甲酯(Z)-6-O-p-metho xy cinnamoyl scandoside methyl ester(化合物2)、(E)-6-O对甲氧基桂皮酰鸡屎藤次苷甲酯(E)-6-O-p-methoxy cinnamoyl scandoside methyl ester(化合物3)、鸡屎藤次苷甲酯scandoside methyl ester(化合物4)、去乙酰车叶草酸甲酯deacetyl asperulosidic acid methyl ester(化合物5)、2-甲基-3-羟基-4-甲氧基蒽醌2-methyl-3-hydroxy-4-me thoxy-anthraquinone(化合物6)、槲皮素-3-O-[2-O-(6-O-E-芥子酰)-β-D-吡喃葡糖基]-β-D-吡喃葡糖苷q uercetin-3-O-[2-O-( 6-O-E-sinapo yl)-β-D-glucop yranoside]-fl-D- glucopyranoside(化合物7)、山奈酚-3-O-(2-O-fl-D-葡萄糖-β-D-半乳糖苷kaermpferol- 3-O-(2-O-β-D-glucop yranoside) -β-D- gahctopyranoside(化合物8)、槲皮素-3-0-[2-0-(6-0-E-阿魏酰)-β-D吡喃葡糖苷-β-D-吡喃葡糖苷quercetin-3-O-[2-O-(6-O-E-feruloyl)-β-D-glucopyranoside]-β-D-glucopyranoside(化合物9)、齐墩果酸oleanicacid(化合物10)、山奈酚kaempferol(化合物11)、槲皮素quercetin(化合物12)、对香豆酸p-coumaric acid(化合物13)、β-胡萝卜苷β-daucosterol(化合物14)、二十四烷酸tetradecanoic acid(化合物15)、二十四烷醇乙酸酯tetracosanol acetate(化合物16)、四十一烷醇1-hentetracontano 1(化合物17)3.白花蛇舌草中总环烯醚萜苷类成分的提取工艺研究采用正交设计法进行白花蛇舌草中总环烯醚萜苷类成分的提取工艺优选,以环烯醚萜苷含量和浸膏得率的综合评分为评价指标,以分光光度法作为含量测定方法,选择乙醇体积分数、提取次数、料液比和提取时间4个因素,每个因素选取3个水平,通过4因素3水平试验优化提取工艺,确定最佳提取工艺为:称取白花蛇舌草药材粉末(过40目筛)50g,加入8倍量的90%乙醇溶液,回流提取2h,提取2次。在最佳工艺条件下进行三批验证试验,结果显示,平均得膏率为10.43%,RSD值为1.64%;总环烯醚萜苷含量均值为22.85%,RSD值为1.80%。4.白花蛇舌草中六种化学成分的HPLC含量测定建立了白花蛇舌草中6个化学成分的HPLC-DAD含量测定方法,包括环烯醚萜类成分(去乙酰车叶草苷酸、车叶草苷),黄酮类成分(槲皮素、山奈酚)和蒽醌类成分(2-羟基-3-甲基1-氧基蒽醌、2-羟基-3甲基蒽醌)。色谱条件:色谱柱为Kromasil C18 (4.6mm×250mm,5μm,以甲醇-乙腈-0.5%o磷酸为流动相系统,检测波长为236,367,274nm。考察了提取方式、提取溶剂、溶剂体积倍数、提取时间对样品提取的影响,最终确定样品溶液制备方法为:采用超声提取的方式,以50倍量甲醇为提取溶剂,提取时间为45min。测定了10批不同产地药材中6种成分的含量,结果显示不同产地白花蛇舌草药材中6种成分的含量存在差异,2种环烯醚萜类成分高于2种黄酮和2种蒽醌类成分。江苏和河南产地白花蛇舌草药材中2种环烯醚萜苷类成分含量较高,山东和内蒙产地2种黄酮类成分含量较高,河南产地2种蒽醌类成分含量较高。