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目的:观察UrocortinⅠ后处理对缺氧/复氧大鼠心肌细胞线粒体通透性转换孔及凋亡蛋白Bax、Bcl-2的影响,探究UrocortinⅠ后处理产生心肌保护效应的线粒体机制。方法:利用离体心脏灌注装置(MPA)分离成年大鼠心肌细胞,将培养24h后的细胞随机分为正常组(Nor组)、缺氧/复氧组(HR组)、UrocortinⅠ后处理组(UcnⅠ组)、5-羟葵酸拮抗UrocortinⅠ组(5-HD+UcnⅠ组)。按下述实验条件进行处理:Nor组:37℃培养箱中持续培养150min;HR组:缺氧40min后,复氧110min;UcnⅠ后处理组:缺氧40min后复氧10min,然后在含UcnⅠ的培养基中处理30min后再复氧70min;5-HD+UcnⅠ组:在给予UcnⅠ处理前先用特异性线粒体ATP敏感性钾通道(mito KATP)拮抗剂5-HD处理10min,余处理同UcnⅠ组。于复氧末对比观察各组细胞(1)倒置相差显微镜下线粒体通透性转换孔(m PTP)的变化;(2)倒置相差显微镜下线粒体膜电位(MMP)的变化;(3)倒置相差显微镜下活性氧自由基(ROS)的变化;(4)Western-Blot法检测各组细胞凋亡蛋白Bax、Bcl-2的表达水平;(5)CCK-8试剂盒检测各组细胞活力。结果:1.m PTP及ROS的变化:Nor组心肌细胞m PTP及ROS荧光强度较其余各组低(P<0.01);Ucn I组及5-HD+Ucn I组较HR组低(P<0.01),但5-HD+Ucn I组高于Ucn I组(P<0.01)。2.MMP的变化:Nor组心肌细胞MMP荧光强度较其余各组高(P<0.01);Ucn I组虽低于Nor组,但高于HR组及5-HD+Ucn I组(P<0.05);5-HD+Ucn I组与HR组差异无统计学意义(P>0.05)。4.Bax、Bcl-2蛋白表达水平:Nor组心肌细胞Bax蛋白表达水平较其余各组低,而Bcl-2蛋白表达水平较其余各组高(P<0.01);Ucn I组Bax蛋白表达水平低于HR组及5-HD+Ucn I组(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达水平高于HR组及5-HD+Ucn I组(P<0.05);5-HD+Ucn I组与HR组相比Bax与Bcl-2蛋白表达水平差异无统计学意义(P>0.05)。5.细胞活力的变化:Nor组心肌细胞活力较其余各组高(P<0.01);Ucn I组虽较Nor组低,但高于HR组及5-HD+Ucn I组(P<0.05),而5-HD+Ucn I组与H/R组差异无统计学意义(P>0.05)。结论:Ucn I后处理能够保护缺氧复氧后心肌细胞的活力,产生一定的心肌保护效应,可能与其能开放mito KAT P通道,减少ROS产生以保护膜的完整性,进而抑制m PTP开放,保护MMP,避免Bax等促凋亡蛋白的释放有关。