菊花提取物通过AMPK信号通路缓解对乙酰氨基酚诱导的大鼠肝脏损伤

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目的:对乙酰氨基酚(Acetaminophen,APAP),别称百服宁、扑热息痛,临床上主要用于感冒发热、偏头痛及手术后止痛等。在半个多世纪的使用过程中,人们利用对乙酰氨基酚解决疾病痛苦的同时也承受着对乙酰氨基酚带来的不良反应,其中最严重的不良反应是肝毒性,长期或过量使用或联合用药会导致肝脏损伤,严重者会导致死亡,目前用于治疗此类肝脏损伤的药物很少,急需研究开发新的治疗药物。―汴梁紫禹‖是开封的一种菊花,前期的研究表明“汴梁紫禹”醇提物(Bianliang ziyu extract,BZE)能够缓解APAP导致的肝损伤,但其作用机制还不十分明确。本研究旨在进一步探究BZE对APAP所致大鼠肝脏损伤的保护机制。方法:成年SD大鼠(220±20g)随机分五组:Control、模型组(APAP组)、实验组(三个给药浓度组);实验组分别连续灌胃给予BZE 110mg/kg/d,220mg/kg/d,440mg/kg/d(0.5%羧甲基纤维素钠溶液配制)10天,Control组及APAP组以1m L/d灌胃给予0.5%羧甲基纤维素钠溶液,各组均自由饮水喂食。末次给药24h后,实验组及APAP组灌胃给予APAP(800mg/kg)诱导肝脏损伤,各组均自由饮水禁食,损伤24h后收集大鼠肝脏样品。试剂盒法测定肝组织中丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、活性氧(Reactive oxygen,ROS)、谷胱甘肽(Glutathione,GSH)及超氧化物歧化酶(Superoxide Dismutase,SOD)的含量;肝脏组织病理学变化用苏木精-伊红(Hematoxylin-eosin,HE)染色法进行观察;蛋白免疫印迹法(Western blot,WB)检测BZE对氧化应激相关蛋白、线粒体生物合成相关蛋白及凋亡相关蛋白的影响。结果:实验结果显示,BZE能够逆转APAP引起的肝组织中GSH、SOD水平降低及MDA、ROS含量增多;蛋白结果表明,BZE提高了磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶(Phosphorylated adenosine monophosphate-activated protein kinase,p-AMPK)、磷酸化糖原合成酶激酶3β(Phosphorylated glycogen synthase kinas 3 bate,p-GSK-3β)、核转录因子NF-E2相关因子2(Nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)以及过氧化物酶增殖物激活受体γ(Peroxisome proliferator activated receptor gamma,PPAR-γ)等蛋白的表达。结论:由以上结果可以说明,BZE可能是通过腺苷酸活化蛋白激酶(Adenosine monophosphate-activated protein kinase,AMPK)途径介导GSK-3β-Nrf2信号通路和线粒体的生物合成,减轻肝脏氧化应激,缓解肝细胞线粒体损伤,从而改善APAP过量导致的大鼠肝脏损伤。
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