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药物的安全、有效是贯穿药物研发和临床使用的核心环节,药物的毒性也是上市药物召回的最直接原因,因而新药开发早期的毒性研究是药物成功上市的关键影响因素。近年来,模式生物斑马鱼已经成为药物毒性筛选和评价的首选模型。随着研究的不断深入,研究发现斑马鱼鱼体对药物吸收的差异性直接影响毒性实验结果,因而需要在斑马鱼毒性实验的同时对斑马鱼鱼体内药物含量进行监测从而进行全面的毒性分析和评价。本研究旨在建立并提供灵敏、有效的LC-MS/MS辅助评价体系,研究斑马鱼体内药物的毒性与吸收。本文将从以下两个部分进行研究：第一部分主要介绍检测斑马鱼体内药物吸收的LC-MS/MS分析方法的建立。包括应用MRM扫描模式建立适用于分析四类不同极性药物的LC-MS/MS定量分析方法,及对定量分析方法的优化,并且对已建立的四类不同极性药物的LC-MS/MS定量分析方法进行方法学验证；第三节为建立头孢菌素MS数据库,并应用IDA建立sMRM-EPI方法分析斑马鱼毒性试验中其体内的头孢菌素。第二部分主要介绍LC-MS/MS分析方法在斑马鱼胚胎毒性试验中的应用。第一节为药物的斑马鱼毒性反应与其体内的吸收研究,包括斑马鱼不同给药发育时期给药剂量与其体内药物含量的关系,和药物在斑马鱼不同给药发育时期的毒性反应及表型；第二节应用已建立的LC-MS/MS方法定量头孢菌素及其杂质在斑马鱼体内的含量,及斑马鱼毒性试验中氨基糖苷类药物的体内含量；第三节应用ADMET Predictor软件预测抗生素在斑马鱼体内的吸收,依据吸收系数Ka值研究抗生素的斑马鱼体内吸收,并应用ADME Predictor模型验证药物的体内吸收。通过上述研究,本文已建立了灵敏、准确的适用于检测斑马鱼体内不同极性药物的MRM LC-MS/MS定量分析方法,该方法符合生物样品体内分析的定量分析方法的方法学要求。通过监测斑马鱼毒性反应中其体内的药物含量,揭示药物毒性与其体内浓度密切相关,可为进一步对药物毒性结果的解释和深入研究提供依据；吸收系数Ka及ADMET Predictor软件对头孢菌素类的吸收进行预测和评价,以及高灵敏度、可同时监测数十种药物的sMRM-IDA-EPI方法的应用,可为药物的进一步安全性评价提供技术依据。