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猪繁殖与呼吸综合征(Porcine Reproductive and Respiratory Syndrome, PRRS)是由猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRS virus, PRRSV)引起的一种高度接触性传染病,2006～2007年,中国南部暴发以死亡率高、传播速度快为特征的高致病性PRRSV (HP-PRRSV),给广大养殖户带来巨大经济冲击。为了解我国PRRSV流行情况和不同免疫背景下发病猪群相关毒株遗传进化和变异特点,本研究对我国不同地点和时间发病猪的病料进行PRRSV流行病学检测、病毒分离。目前,疫苗免疫是预防和控制]3P-PRRS的重要措施,虽然商品化弱毒疫苗较灭活苗可以更快诱发机体的特异性免疫,但在临床使用中弱毒疫苗的免疫时间、免疫剂量及免疫次数等方面经常出现使用混乱的现象,而且对其免疫效果仍缺乏较完善的评价体系,因此本研究对市场常用的两种商品化PRRS活疫苗JXA1-R和CH-1R进行了免疫效果评价。研究内容如下：1. PRRSV流行毒株的分离及遗传变异分析2012-2013年,本研究在湖北、湖南、广东、河南等地采集临床样品720份,PRRSV检测总阳性率为49.3%,分离得到46株遗传免疫背景清楚的样品,并对其部分NSP2基因、ORF5基因进行序列测定,比对显示46株PRRSV之间部分NSP2氨基酸同源性为83.8%-100%,NSP2蛋白普遍存在不连续30个氨基酸缺失,缺失位置与高致病性JXAl相同,同时46株PRRSV之间ORF5氨基酸同源性为91.0%-100%,与VR-2332相比,GP5序列出现多处突变,尤其是抗原表位序列,此外,N糖基化位点的位置和数量也发生了改变,对46株PRRSV的GP5TM区预测发现有33株序列存在氨基酸变异较高的TMl区。2.HZ-31全基因组序列分析分离得到一株新的PRRSV,命名为HZ-31,测序分析发现HZ-31的NSP2基因在471-500aa、533-561aa位点共缺失59个氨基酸,并且其基因组两端非编码区各存在一个碱基的缺失,是一种新的变异株。3.对JXA1-R活疫苗和CH-1R活疫苗进行免疫效果评价PRRS活疫苗可快速刺激机体产生体液免疫,JXA1-R活疫苗比CH-1R活疫苗的ELISA抗体转阳时间更早,水平更高,同时中和抗体出现时间更早,水平更高,在抵御强毒攻毒时,JXA1-R诱导宿主产生的中和抗体可中和血清中的PRRSV,与病毒血症的消除呈正相关。两种活疫苗在免疫和攻毒期间均未检测出高水平的IFN-γ。两种活疫苗在免疫期间均检测到病毒血症的存在,攻毒后JXA1-R组病毒血症迅速消失,CH-1R组的病毒血症持续存在。JXA1-R组和CH-1R组攻毒后均无鼻腔排毒,对照组轻微排毒,JXA1-R组攻毒后粪拭子无排毒,CH-1R组和对照组在攻毒后第10d均有排毒。剖检可见JXA1-R组病变轻微,CH-1R组个别猪只肺部有出血点,肺门淋巴结充血,对照组肺部肉样实变,肺门淋巴结严重充血、出血,个别猪只肾有出血点。JXA1-R组和CH-1R组在肺、脾、肾、脑的病毒载量与对照组差异显著。