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三七(Panax Notoginseng(Burk.) F.H.Chen)为五加科人参属多年生草本植物。目前在三七全株中应用最多的是三七的块根,国内外学者对三七根的化学研究报道较多,而对三七花的研究较少。现代研究表明,三七花具有镇痛镇静、抗炎、治疗心律失常、抑制细胞增殖等药理作用,因此,三七花具有较大的药用开发价值。本文对三七花中的多糖类成分进行了研究。主要内容包括:
第一章:综述了三七花的化学成分和药理活性研究进展,并对多糖的研究现况进行了概述,包括多糖的药理作用、分离纯化及结构鉴定方法等。
第二章:采用水提醇沉法提取了三七花多糖,并设计三种方法考察了多糖的脱蛋白效果,最后建立了三氯乙酸法与sevag相结合的方法进行脱蛋白。采用DEAE-Sepharose Fast Flow阴离子交换剂对三七花多糖进行了纯化,得到三个精制纯化多糖组分:PNFⅠ,PNFⅡ,PNFⅢ,经高效凝胶渗透色谱法进行纯度鉴定,得到PNFⅡ,PNFⅢ为均一组分。
第三章:考察了三七花多糖的测定方法,测定了云南文山三七花中多糖的含量。本章以葡萄糖为标准品,采用苯酚-硫酸法作为多糖含量的测定方法,得到葡萄糖标准曲线在7.59-75.90μg/ml范围内呈现很好的线性关系,线性相关系数r=0.9999,平均回收率为97.97%,样品溶液显色后吸光度在3小时内稳定无变化,且具有很好的重现性,平均RSD为1.58%。测定了精制三七花多糖对葡萄糖的换算因子,根据换算因子得到实验所用云南文山三七花中多糖含量为2.34%。
第四章:采用糖醇乙酸酯衍生化法将水解后的三七花多糖衍生为易挥发物质,通过气相色谱测定三七花多糖的单糖组成及摩尔比。实验中系统地对色谱柱和色谱条件进行了考察和选择,最后决定采用GsBP-5石英毛细管柱进行单糖组成的测定。实验结果表明:精制三七花多糖和三部分纯化多糖PNFⅠ、PNFⅡ、PNFⅢ的组成单糖均含有鼠李糖、阿拉伯糖、木糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖,其中PNFⅠ主要由阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖组成;PNFⅡ主要由阿拉伯糖和半乳糖组成;PNFⅢ主要组成单糖为鼠李糖、阿拉伯糖、半乳糖。红外光谱法分析推断PNFⅡ中含有糖醛酸,并为核磁共振碳谱所证实。核磁共振碳谱推断PNFⅡ可能含有α-L-阿拉伯呋喃糖、β-D-半乳吡喃糖、α-D-半乳吡喃糖,并推断出可能含有1→5-连接-α-L-阿拉伯呋喃糖残基和1→4连接-α-D-半乳吡喃糖残基。其连接类型、结构、含有何种糖醛酸还有待更多的实验来进一步验证。多糖残基的连接顺序、连接方式、含有何种糖醛酸等,还有待更多的实验来进行确定。