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目的：肥胖、血脂异常、脂肪肝等代谢性疾病已经成为严重影响人类健康的常见病及多发病,但其发病机制尚不完全清楚。目前认为由营养物和代谢产物所触发的低丰度的代谢性炎症反应是代谢性疾病发生发展的核心环节。脂肪酸转运酶/CD36 (fatty acid translocase/CD36, FAT/CD36)属于B类清道夫受体家族,不仅可以介导长链脂肪酸的跨膜转运,还可识别众多致炎性的内源性代谢产物,与代谢性炎症的发生密切相关。本课题选用C57BL/6J小鼠、野生型(widetype,WT)/CD36基因敲除(CD36 knockout, CD36KO)小鼠及3T3-L1脂肪细胞,研究高脂饮食对脂肪组织CD36的表达和炎症反应的影响,并进一步探讨CD36在脂肪组织代谢性炎症中的作用。方法：将8周龄雄性C57BL/6J小鼠分别随机分为普通饮食组(normal chew diet, NCD)和高脂饮食组(high fat diet, HFD),喂养14周后,酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay, ELISA)测定小鼠血清游离脂肪酸(free fatty acid, FFA)含量；应用荧光实时定量(Real-Time PCR, RT-PCR)和western blot检测脂肪组织中CD36及炎症因子白细胞介素1(Interleukin-1, IL-1β)、白细胞介素6(Interleukin-6, IL-6)、肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)趋化因子单核细胞趋化蛋白-1(Monocyte chemotactic protein-1, MCP-1),巨噬细胞炎性蛋白-1(Macrophage inflammatory protein-1, MIP-1) mRNA和蛋白表达；免疫组织化学染色检测脂肪组织CD36、巨噬细胞表面标记物F4/80蛋白表达；进一步,选用8周龄雄性WT和CD36KO小鼠给予高脂饲料喂养14周,用上述方法检测WT和CD36KO小鼠的脂肪组织炎症反应。3T3-L1小鼠成纤维细胞,经诱导分化为脂肪细胞后分为：对照组(Control, CTL)、不同浓度棕榈酸处理组(Palmitic acid,PA)处理时间为24小时。采用油红O染色观察3T3-L1成纤维细胞脂滴形成情况；RT-PCR和Western Blotting检测3T3-L1脂肪细胞CD36、炎症因子(IL-1β,IL-6,TNF-α)、趋化因子(MCP-1,MIP-1)、C-Jun氨基末端激酶(Jun N-terminal kinase, JNK)、磷酸化C-Jun氨基末端激酶(PhosphorylationJun N-terminal kinase, P-JNK)蛋白表达,双荧光素酶报告基因检测脂肪细胞NFκB活性；提取脂筏并用western blot检测小窝蛋白1(caveolin-1)、CD36含量；免疫共沉淀(Co-Immunoprecipitation, CO-IP)检测脂肪细胞CD36/TLR4共聚体的形成。结果：与普通饮食组相比,高脂饮食能使C57BL/6J小鼠血清FFA明显增加,使脂肪组织内CD36 mRNA约升高了3.23±0.64倍(P<0.05),CD36蛋白表达约升高了0.49±0.10倍(P<0.05)；炎症因子IL-1、TNF-α、IL-6 mRNA分别约升高了0.78±0.46倍、1.69±0.65倍、0.94±0.52倍(P<0.05)；趋化因子MCP-1和MIP-1 mRNA分别约升高0.89±0.20倍、1.94±0.38倍(P<0.05)；相应炎症因子TNF-α、 IL-1、IL-6,趋化因子MCP-1、MIP-1的蛋白表达也呈明显升高趋势(P<0.05),同时巨噬细胞浸润显著增加。与高脂饮食喂养的WT小鼠相比,CD36KO小鼠的脂肪组织炎症因子IL-1、TNF-α、IL-6的mRNA含量分别为WT小鼠的0.56±0.12、0.35±0.097、0.27±0.051(P<0.05)；趋化因子MCP-1和MIP-1的mRNA表达为WT小鼠的0.59±0.15和0.43±0.12(P<0.05)；同时CD36KO小鼠脂肪组织炎症／趋化因子INF-α、IL-1、IL-6、MCP-1、MIP-1的蛋白表达也明显降低(P<0.05),巨噬细胞浸润显著减少。进一步在体外细胞实验中,RT-PCR及Western Blotting检测发现棕榈酸能使脂肪细胞CD36、炎症因子(IL-1β、IL-6、 TNF-α)、趋化因子(MCP-1、MIP-1)基因蛋白表达量升高(P<0.05)。提取3T3-L1脂肪细胞脂筏发现,PA处理组的定位脂筏部分CD36蛋白占总表达量的比例增加(P<0.05)。免疫共沉淀发现PA能使CD36/TLR4共聚体形成增加(P<0.05)。同时Western Blotting检测表明PA处理条件下PJNK/JNK水平增加(P<0.05)。双荧光素酶报告基因检测发现,与对照组相比PA能使脂肪细胞NFκB活性增强(P<0.05)。结论：高脂或棕榈酸能显著上调脂肪组织及脂肪细胞CD36的表达,促使CD36/TLR4共聚体的形成,进而激活JNK/NFκB炎症信号通路,参与了代谢性炎症的发生。