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目的:构建LETM1基因真核表达载体,并检测肝癌HepG2细胞株的LETM1基因突变,探讨线粒体LETM1基因在肝癌发生中的意义。方法:从HepG2株细胞中提取mRNA及合成cDNA,设计并合成LETM1基因引物。用PCR方法扩增LETM1基因,连接到真核表达载体pCMV-3Tag-6、 pCMV-3Myc-2A上,构建重组质粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1。将质粒进行HindⅢ/Xho Ⅰ双酶切、测序和检测突变位点。结果:成功构建了重组质粒pCMV-3Tag-LETM1和pCMV-3Myc-LETM1;测序LETM1基因序列长度为5462bp;肝癌HepG2细胞株的LETM1基因突变发生于G148A(缬氨酸→异亮氨酸)、G320A(甘氨酸→天冬酰胺)、G344A(精氨酸→组氨酸)、A1760G(赖氨酸→精氨酸)和A1825G(苏氨酸→丙氨酸)。结论:1.LETM1基因突变最常发生于G148A(缬氨酸→异亮氨酸)和A1760G(赖氨酸叶精氨酸);其次为G344A(精氨酸→组氨酸)。G320A(甘氨酸→天冬酰胺)和A1825G(苏氨酸→丙氨酸)亦发生突变。2.线粒体LETM1基因的突变可能与肝癌的发生有一定的关系。