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本研究通过对63例新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿血清血管内皮生长因子(VEGF)、肌酸磷酸激酶(CK)及脑型同工酶(CK-BB)的动态检测,并与正常新生儿对照,目的是分析此三项指标在HIE时的病理生理意义,探讨三者在HIE时评价病情及估计预后的临床价值,并为VEGF的临床应用提供理论依据。
研究方法:研究对象:(1)HIE组:选择出生时有窒息并确诊为HIE的新生儿63例(轻度18例,中度33例,重度12例)。(2)对照组:20例,为正常健康足月新生儿。列为本研究观察对象新生儿均为胎龄37~42周,体重2500-4000g,性别和出生方式不限,做到胎龄、出生体重、性别、产式方面无差异,无先天畸形及其它疾病,所有入选新生儿的母亲均身体健康。
标本采集:窒息新生儿和正常足月儿,分别在出生即刻、生后24小时(24h)、生后72小时(72h)、生后7天(7d)采集空腹静脉血3ml,以3000转/分离心15分钟,分离出血清,留取100ug15-30℃保存,于一周内采用酶偶联速率法、电泳法分别检测CK、CK-BB,余-20℃保存并采用酶联免疫法检测VEGF。
统计方法:应用SPSS10.0软件包对两样本均数计量资料t检验,多组样本间采用方差分析(F),各组数据间采用直线相关分析(r),p<0.05为有差异显著性。
研究结果:
1.HIE患儿血清VEGF含量动态变化:HIE组血清VEGF浓度在出生即刻表达为最高峰,与对照组比较具有显著差异(477.3±238.6)对(146.4±23.7),(p<0.01);24h时已明显下降,但与对照组比较仍有显著差异(268.2±113.5)对(134.3±29.2)(p<0.01);到72h、7d时继续下降无统计学意义(p>0.05)。
2.HIE患儿血清CK、CK-BB含量动态变化:HIE组血清CK和CK-BB水平于出生即刻表达已有升高,与对照组具有差异,CK为(535.00±172.27对323.16±95.43),(p<0.01);CK-BB为(31.78±20.31)对(19.29±11.55),(p<0.05)。之后逐渐上升,72h为高峰,与对照组比较差异相当显著CK为(1719.60±232.38)对(382.62±113.56),CK-BB为(382.62±113.56)对(23.16±16.52),(p<0.01),7d时表达水平下降,但与对照组比较仍有显著差异(p<0.05)。
3.不同程度HIE患儿血清VEGF、CK、CK-BB动态变化:
3.1.不同程度HIE患儿VEGF动态变化:出生即刻轻、中、重三组血清VEGF含量依次升高,分别为(252.71±73.95)、(307.23±85.64)、(473.50±107.21),均明显高于对照组,(146.47±23.73),具有显著差异(p<0.01)。24h时各组均已表现明显下降,分别为(157.35±65.01)、(238.46±85.33)、(287.08±92.61),与对照组(134.36±29.27)比较,中、重度仍具有统计学意义(p<0.05,p<0.01);72h时仅重度组与对照组比较有统计学意义(198.16±78.31对135.70±24.78),(p<0.05);7d时呈低水平稳定表达。
3.2.不同程度HIE患儿血清CK动态变化:出生即刻轻、中、重CK水平依次升高,与对照组比较除轻度外均有差异,分别为(365.35±105.04)、(510.21±135.37)、(857.63±157.72)对(323.16±95.43),(p>0.05,p<0.05,p<0.05);之后逐渐上升,而且上调的高峰在生后72h,分别为(520.27±116.35)、(1927.33±172.71)、(2947.36±195.83)对(382.62±113.56),均有差异显著性(p<0.05,p<0.01,p<0.01),7d时表达水平下降,但中、重度患儿与对照组比较仍有显著差异(p<0.05)。
3.3.不同程度HIE患儿血清CK-BB:出生即刻水平随病情轻、中、重而依次升高,与对照组比较除轻度外均有差异,分别为(21.51±10.39)、(31.47±15.33)、(48.02±18.54)对(19.29±11.55),(p>0.05,p<0.05,p<0.05);之后逐渐上升,上调的高峰在生后72h,分别为(47.15±17.46)、(47.15±17.46)、(217.72±31.34)对(23.16±16.52),与对照组比较均有差异显著性(p<0.05,p<0.01,p<0.01),7d时表达水平下降,但与对照组比较中、重度患儿仍有显著差异(p<0.05)。
研究结论:
1.VEGF、CK、CK-BB参与了新生儿HIE的病理生理过程,与HIE的发生、发展密切相关。
2.HIE时VEGF表达上调是机体应激状态下的一种保护反应,CK增高是细胞损伤的表现,并可能是缺氧缺血性损伤的一种能量代偿机制,提示VEGF的高表达对HIE的早期诊断有重要参考价值,CK、CK-BB可作为HIE脑损伤的评价指标
3.HIE时VEGF、CK、CK-BB的水平的动态变化与脑损伤的程度有关,动态观察此三项指标对判断HIE脑损伤的程度、病情发展及预后有重要的临床意义。
4.本研究为VEGF在新生儿缺氧缺血性脑损伤疾病的临床应用提供了理论依据,对HIE的早期干预具有一定的临床价值。