赭曲霉毒素A(OchratoxinA，OTA)是由曲霉属和青霉属的某些菌种产生的一种真菌毒素，具有肾毒性、肝毒性、致畸性和免疫毒性。及时进行OTA检测是预防其对人类和动物造成危害的主要手段。酶联免疫吸附分析方法(ELISA)由于具有操作简单、快捷、不需要复杂的仪器设备和可同时测定大批量样品等优点，对检测OTA有极高的应用价值。然而，常规ELISA方法检测OTA必须涉及到标准品OTA和偶联OTA的使用，不仅给试剂的生产和使用者带来毒性危害，而且还存在OTA的标准品价格昂贵和进口受限制等问题。噬菌体展示文库技术可用来筛选能模拟原始蛋白质或小分子量物质的结构和功能的多肽分子，因此可利用这一技术获得OTA的替代品来解决这一问题。 为了建立不使用OTA的无毒ELISA分析方法，本研究将OTA的羧基与载体蛋白的氨基共价连接，制备了OTA人工抗原并免疫BALB/C小鼠，再通过杂交瘤细胞技术制备了二种抗OTA的单克隆抗体。为了获得能替代OTA使用的模拟表位肽，以一种单克隆抗体作为靶分子，对融合表达在M13丝状噬菌体衣壳蛋白Ⅲ上的随机七肽库进行亲和筛选，通过ELISA方法筛选和鉴别具有模拟表位的阳性噬菌体克隆，并用阳性克隆替代OTA建立了无毒ELISA分析方法；通过对阳性克隆进行DNA测序确定模拟表位肽的氨基酸序列及共有序列，同时经化学方法合成二种多肽对模拟表位肽进行验证，并用Antheprot4.6软件对模拟表位肽的二级结构进行计算机分析探讨其作用机理。经过四轮筛选，共获得了11株具有模拟表位肽的阳性噬菌体克隆，模拟表位肽的共有序列是异亮氨酸-精氨酸(或缬氨酸)-脯氨酸-蛋氨酸-缬氨酸(或亮氨酸)-X-X，缩写为IR(V)PMV(L)XX(X为任意氨基酸)。其中利用克隆P2建立的检测方法最为灵敏，其线性范围在200-8000pg/mL之间，检测下限为150pg/mL，与赭曲霉毒素B的交叉反应率为35％，与桔霉素、黄曲霉毒素B1和展青霉素等毒素交叉反应低于0.01％。该方法经常规ELISA和高效液相色谱(HPLC)分析方法验证，显示了良好的应用前景。研究结果表明OTA的模拟表位肽可作为OTA的替代品建立无毒ELISA分析方法，其作用机理可能是模拟表位肽模拟了OTA分子与抗体之间的疏水作用。