蝴蝶兰组织培养快繁技术的优化

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本论文对蝴蝶兰组织培养快繁技术的优化进行了较系统的研究,主要结果如下: (1)用腋芽启动的幼嫩花梗培养,灭菌15min最佳;培养基为MS+6-BA3.0mg/L时出芽率最高,达90%以上。 (2)茎尖原球茎状体诱导率较高,培养基为MS+6-BA5.0mg/L+NAA0.5mg/L时诱导率最高,达100%;切割茎尖顶端有利于诱导原球茎状体。 (3)原球茎状体增殖的最佳培养基为MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.2mg/L+1.5‰活性炭,增殖系数达2.3;原球茎块在培养瓶内有群体优势效应,切块3.0mm时增殖系数最大。 (4)原球茎在较长时间不进行转移就可变绿分化。添加6-BA和NAA的1/2MS有利于生根,平均根数达到3.2条。 (5)过渡培养能够提高蝴蝶兰组培苗移栽成活率,比对照提高12.5个百分点;室内炼苗3d+室外炼苗3d有利于移栽,移栽成活率达90.0%。苔藓为适宜栽培基质。获得体细胞无性系变异材料2份:一种是圆叶蝴蝶兰,另一种是裂叶蝴蝶兰。 (6)利用农杆菌菌株GV3101(质粒pBI121),对绿色荧光蛋白基因GFP导入技术进行了初步研究。在20mg/L卡那霉素(Kan)选择培养基上获得蝴蝶兰原球茎分化和生根的健壮植株129株。PCR检测结果表明,其中59株是转基因植株。
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